ISSN:
1871-4528
Keywords:
ring rot diagnosis
;
potato
;
Arthrobacter globiformis
;
A. aurescens
;
A. chrystallopoites
;
A. oxydans
;
A. ramosus
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Agriculture, Forestry, Horticulture, Fishery, Domestic Science, Nutrition
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Es wird über die Ergebnisse einer vergleichenden serologischen Untersuchung von drei Stämmen vonCorynebacterium sepedonicum und 11 Stämmen vonArthrobacter mit Hilfe der Immunfluoreszenz-Antikörper-Färbung (IFAS) berichtet. Die Immunfluoreszenzfärbung wurde mit der indirekten Methode quantitativ durchgeführt. Das Antiserum wurde mit durch Erhitzen abgetöteten Zellen vonC. sepedonicum NCPPB2140 hergestellt und sein Titer mit 1∶2000 durch einen quantitativen Agglutinationstest ermittelt. Die Bakterien wuchsen auf Hefe-Dextrose-Kalzium Agar (YDC) bei 27°C. Erhitzte und nicht erhitzte Zellen von jungen (24 h) und alten (1 Woche) Kulturen aller Stämme wurden geprüft. Für jeden Stamm wurde die Anfärbung in allen Kombinationen mit zwei Verdünnungen des Antiserums (1∶100 und 1∶1000) durchgeführt. Die mit Fluorescein markierten Antiglobuline wurden in einer Verdünnung von 1∶16 benutzt. Eine Kreuzreaktion trat nur zwischenA. polychromogenes undC. sepedonicum auf (Tabelle 1). Bei einer Verdünnung des Antiserums von 1∶1000 war jedoch die Fluoreszenz der Zellwände sehr schwach und in den jungen erhitzten Zellen nicht zu finden. Sehr schwer zu deuten waren die Reaktionen mitA. aurescens, A. chrystallopoites, A. oxydans undA. ramosus. C. sepedonicum NCPPB2140 undA. polychromogenes wurden sowohl in Reinkultur als auch vermischt mit Kartoffelgewebe bei steigender Verdünnung des Antiserums bis 1∶3000 verglichen. Bei Verdünnungen über 1∶500 wurden nur Zellen vonC. sepedonicum angefärbt. Einige Aspekte der Technik der Immunfluoreszenzfärbung, die Natur der gemeinsamen Antigendeterminanten und die Anwendbarkeit der Immunfluoreszenzfärbung für den Nachweis vonC. sepedonicum in infizierten Knollen werden besprochen.
Abstract:
Résumé Cette étude sérologique en immunofluorescence par coloration des anticorps (IFAS) met en comparaison trois souches deCorynebacterium sepedonicum et onze souchesd'Arthrobacter. La coloration par la méthode indirecte pour l'immunofluorescence a été quantitativement performante. L'antisérum a été préparé avecC. sepedonicum NCPPB 2140 détruit par la chaleur et le titre de la préparation a été évalué à 1/2000 par les test d'agglutination. Les bactéries ont été cultivées sur YDC agar à 27°C. Les cellules bactériennes traitées et non traitées par la chaleur des jeunes (24 h) et vieilles (1 semaine) cultures de toutes les souches ont été testées. Pour chaque souche, la coloration a été faite pour toutes les combinaisons en présence de deux dilutions d'antisérum (1/100, 1/1000). Des globulines de lapin marquées à la fluoresceine ont été utilisées à la dilution de 1/16. SeulA. polychromogènes a donné une réaction croisée avecC. sepedonicum (tableau 1). Cependant, à la dilution de 1/1000, la fluorescence des parois cellulaires a été très faible et non décelable dans les jeunes cellules bactériennes traitées par la chaleur.A. aurescens, A. chrystallopoites, A. oxydans etA. ramosus ont donné des réactions difficiles à interpréter.C. sepedonicum NCPPb 2140 etA. polychromogènes ont aussi été comparés à des dilutions de l'antisérum plus élevées telles que 1/3000 dans des cultures pures et en mélange avec des tissues de pomme de terre. Pour un dilution antérieure au 1/500, seules les cellules deC. sepedonicum ont été colorées. Quelques aspects de la technique par coloration en immunofluorescence, la nature de la fonction antigènique commune et l'application de la coloration en immunofluorescence pour la détection deC. sepedonicum dans les tubercules infectés sont discutés.
Notes:
Summary In a comparative serological study using indirect fluorescence antibody staining (IFAS) on three strains ofCorynebacterium sepedonicum and eleven strains of the genusArthrobacter, onlyA. polychromogenes cross-reacted withC. sepedonicum. The antiserum titre was 1∶2000 and its dilution was critical for identifying cross-reactions. At dilutions higher than 1∶500, onlyC. sepedonicum showed intense fluorescence and sharp edges of the walls; species ofArthrobacter gave reactions of uncertain interpretations. Some aspects of the immunofluorescence staining technique, the nature of common antigenic determinants, and the applicability of the immunofluorescence staining for detectingC. sepedonicum are discussed.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF02357308
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