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  • 1
    Electronic Resource
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    Springer
    Annals of hematology 37 (1978), S. 265-270 
    ISSN: 1432-0584
    Keywords: Knochenmark ; Megakaryozytäre Vorläuferzellen ; Megakaryopoese ; Immunfluoreszenz ; Antithrombozytenserum ; Zytophotometrie ; Bone marrow ; Megakaryocytic precursor cells ; Megakaryopoiesis ; Immunofluorescence ; Antithrombocytic serum ; Cytophotometry
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Medicine
    Description / Table of Contents: Summary The DNA-content of fluoresceine-labeled platelet antigen containing cells of mouse bone marrow was measured. For immunofluorescence highly specific anti-mouse-platelet-serum and fluoresceine-conjugated antigammaglobuline was used, applying the “sandwich” technique. Three hundred panoptically identifiable megakaryocytes served as control group. The DNA-polyploidization pattern of megakaryocytes and immunofluorescence positive cells was almost identical. However, among the immunofluorescence positive cells a considerable amount of cells showed DNA-values lower than 4c, whereas the megakaryocytes of the Pappenheim stained smears revealed no DNA values lower than 4c. The percentages of diploid and tetraploid cells, respectively, was 6 and 7% compared with 0 and 1% of panoptically identifiable megakaryocytes. The results suggest that young megakaryocytic cells with diploid and tetraploid DNA-values can be detected by immunofluorescence technique, indicating that the flow from the uncommited to the committed megakaryocytic precursor cell appears at this early stage of megakaryocyte production.
    Notes: Zusammenfassung Es wurde der DNA-Gehalt von fluoreszeinmarkierten, Thrombozytenantigen enthaltenden Zellen im Knochenmark der Maus untersucht. Die Immunfluoreszenz wurde mit hochspezifischem Anti-Mäuse-Thrombozyten-Serum nach der „sandwich“-Methode mit fluoreszeinkonjugiertem Antigammaglobulin durchgeführt. Als Vergleich dienten 300 nach panoptischen Kriterien differenzierbare Megakaryozyten. Das DNA-Verteilungsmuster der Megakaryozyten und der immunfluoreszenzpositiven Zellen war weitgehend identisch. Allerdings wiesen die immunofluoreszenzpositiven Zellen DNA-Werte auch unterhalb 4c auf, während die im Pappenheim-Präparat differenzierbaren Megakaryozyten keine DNA-Werte in diesem Bereich erkennen ließen. Der Anteil diploder bzw. tetraploider immunfluoreszenzpositiver Zellen betrug 6 bzw. 7% im Vergleich zu 0 bzw. 1% bei den panoptisch differenzierbaren Megakaryozyten. Die Ergebnisse lassen den Schluß zu, daß mit Hilfe der Immunfluoreszenz megakaryozytäre Zellen mit diploidem bzw. tetraploidem DNA-Gehalt nachgewiesen werden können. Dies deutet darauf hin, daß der Einstrom der Zellen aus dem undeterminierten Vorläuferzellkompartment in das determinierte Kompartment bereits auf dieser frühen Stufe der Megakaryozytenproduktion stattfindet.
    Type of Medium: Electronic Resource
    Library Location Call Number Volume/Issue/Year Availability
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  • 2
    Electronic Resource
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    Springer
    Annals of hematology 55 (1987), S. 459-466 
    ISSN: 1432-0584
    Keywords: Bone marrow ; Megakarocyte precursor cells ; Immunofluorescence ; Antiplatelet antibody ; Cytophotometry
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Medicine
    Notes: Summary A sequential preparation method is described which allows immunological identification, morphological characterization, cytophotometric determination of relative DNA content of the megakaryocyte lineage as well as quantitation of megakaryocyte precursors in human bone marrow aspirates. We compared several monoclonal (anti-GP IIIa and HD 19) and polyclonal (A 225, RAHPS) antiplatelet antibodies for immunoflurescent staining. Among the identified cells, a small number of cells showing a diploid and tetraploid DNA content were found which must be regarded as promegakaryoblasts, representing 2.5–4.7% of all megakaryocytes. The heterogenous morphology of these precursors in panoptically stained smears is described.
    Type of Medium: Electronic Resource
    Library Location Call Number Volume/Issue/Year Availability
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  • 3
    ISSN: 1432-1440
    Keywords: Cytophotometry ; autoradiography ; DNA-synthesis ; plasma cell leukaemia ; morbus waldenstroem ; Go-Cells ; Cytophotometrie ; Autoradiographie ; DNS-Synthese ; Plasmazelleukämie ; Morbus Waldenström ; Go-Zellen
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Medicine
    Description / Table of Contents: Zusammenfassung Bei 2 Fällen von Plasmazelleukämie und einem Fall mit Morbus Waldenström mit leukämischem Blutbild wurden die Blasten im Knochenmark und Blut nach intravenöser Injektion von3H-TdR (flash-Markierung) mit der Kombination von cytophotometrischer DNS-Bestimmung und Autoradiographie untersucht. Die Beobachtung des Durchganges der3H-TdR markierten Zellen durch die cytophotometrisch ermittelten Zellcyclusstadien (2c–4c) bei den zwei Fällen mit Plasmazelleukämie erlaubte die Ermittlung der DNS-Synthesezeit (12–24 Std) und der Generationszeit (48–60 Std). Diese Daten konnten durch die Ergebnisse der markierten Mitosekurve bestätigt werden. Die Blasten, die eine Stunde nach3H-TdR-Gabe nicht markiert waren, gehörten fast ausschließlich einer diploiden Zellpopulation an (G0 bzw. G1). Von den cytophotometrisch-autoradiographischen Daten und den Ergebnissen der markierten Mitosekurve wurde bei einem Fall die Größe des G0-Kompartments kalkuliert. Diese macht etwa 46% der Blasten aus. Die Bedeutung der out-of-cycle Zellen für die cytostatische Behandlung und für die Entstehung des Rezidivs wird diskutiert.
    Notes: Summary In two cases with plasma cell leukaemia and in one case with a leukaemic variant of M. Waldenström, the leukaemic blast cells of the bone marrow and peripheral blood upon in vivo flash-labelling with3H-TdR, were studied by combined application of cytophotometric determination of the DNA content and by autoradiography. In plasma cell leukaemia, DNA synthesis time (12–24 h) and generation time (48–60 h) was estimated by observation of the3H-TdR-labelled cells within the cell cycle stages (2c–4c) at different times. The results were confirmed by the data obtained from the labelled mitosis curve. The leukaemic blast cells showing no labelling one hour after3H-TdR injection were mostly diploid (G0 or G1). The results of the combined cytophotometric and autoradiographic investigations and the labelled mitosis curve allowed for calculation of the size of the G0-compartment indicating that about 46% of the leukaemic blast cells were out of cycle at the time of investigation. The significance of the out-of-cycle cells for treatment and initiation of relapse is discussed.
    Type of Medium: Electronic Resource
    Library Location Call Number Volume/Issue/Year Availability
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  • 4
    ISSN: 1432-0878
    Keywords: Erythropoiesis ; Nucleated Red Cells ; Cell cycle ; Autoradiography ; Cytophotometry
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Biology , Medicine
    Description / Table of Contents: Zusammenfassung Um die Abhängigkeit der erythropoietischen Zellformen von ihrer Stellung im Generationszyklus (G1, S und G2) zu untersuchen, wurde das Knochenmark von vier Normalpersonen mit der Kombination von zytophotometrischer DNS-Bestimmung (Feulgen-Photometrie) und autoradiographischer Technik mit 3H-TdR (in vitro) untersucht. Die Zellen wurden vor dieser Untersuchung in den nach Pappenheim gefärbten Ausstrichen differenziert. Sowohl in der Gruppe der basophilen Erythroblasten (E1-E3) als auch bei den polychromatischen Normoblasten (E4) wurde eine postmitotische (G1) und eine prämitotische Ruhephase (G2) nachgewiesen. Beide Zellgruppen waren zu ca. 65% mit3H-TdR markiert (S). Unter den basophilen Erythroblasten war bei E1 eine G2-Phase, jedoch keine G1-Phase nachweisbar. Demgegenüber fand sich bei E3 eine ausgeprägte G1-Phase, hingegen keine G2-Phase. Bei E2 war sowohl eine G1-Phase als auch eine G2-Phase erkennbar. Nach diesen Befunden stellen die Erythroblasten E1-E3 keine Zellgruppen mit jeweils vollständigem Generationszyklus dar, sondern sind als ein Zellkompartment zu verstehen, in dem die G1-Phase vorwiegend durch die kleineren Zellen, die zytologisch die Merkmale der basophilen Normoblasten besitzen, und die G2-Phase vorwiegend durch die größeren Zellen vom Typ der Proerythroblasten und Makroblasten repräsentiert wird.
    Notes: Summary In the different types of normal human nucleated red cells the stages of the cell cycle (G1, S and G2) were investigated by combined application of the cytophotometric determination of the DNA content (Feulgen photometry) and of autoradiographic labelling using 3H-TdR in vitro. The individual cells were identified in Pappenheim stain. In the basophilic erythroblasts (E1-E3) as well as in the polychromatic erythroblasts (E4) about 62–65% of the cells were labelled (S). The unlabelled cells partly were diploid and partly were tetraploid, representing G1 and G2. The oxyphilic erythroblasts (E5) mostly were diploid and unlabelled (G1). Within the basophilic erythroblasts G1 was demonstrated mainly in E3, and G2 was demonstrated mainly in E1. In E2, G1 as well as G2 were present. The results indicate that all basophilic erythroblasts belong to one cell compartment, in which G1 is represented by the smaller cells commonly subclassified as basophilic normoblasts and G2 is represented by the large cells usually called proerythroblasts and macroblasts.
    Type of Medium: Electronic Resource
    Library Location Call Number Volume/Issue/Year Availability
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