ISSN:
1432-0738
Keywords:
Haloalkanes
;
Irreversible (covalent) binding
;
Liver
;
Protein
;
Lipid
;
Haloalkane
;
Irreversible (covalente) Bindung
;
Leber
;
Protein
;
Lipid
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Medicine
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung 1) Nach intraperitonealer Injektion von markiertem CCl4, CHCl3 und Halothan an Mäuse wird 14C bevorzugt an Protein und Lipid des endoplasmatischen Reticulums gebunden. Eine bemerkenswerte Aktivität befindet sich auch in Bestandteilen der Mitochondrien. Die höchste Proteinbindung betrug (nMol/mg): CCl4: 2,8 (0,5 hrs); CHCl3: 11,5 (6 hrs); Halothan: 5,0 (6 hrs). Bindung an Lipide: CCl4: 6,4 (5 min); CHCl3: 8,0 (4 hrs); Halothan: 13,5 (2 hrs). Der Verlauf der Bindung an mikrosomale und mitochondriale Proteine und Lipide war bei den einzelnen Haloalkanen unterschiedlich. 2) Die irreversible Bindung von 14C aus markierten Haloalkanen in aeroben Suspensionen von isolierten Kaninchen-Lebermikrosomen und NADPH betrug nach 30 min für Protein (Lipid): CCl4: 15 (38); CHCl3: 3,4 (3,2); Halothan: 2,3 (10,0); Trichlorfluormethan: 6,5 (30). Inkubation unter anaeroben Bedingungen begünstigte die Enthalogenierung, jedoch ist Sauerstoff für den Stoffwechsel und für die irreversible Bindung erforderlich. Die größten Unterschiede der Bindungsgeschwindigkeiten wurden bei CHCl3 mit Lebermikrosomen von Ratten, Mäusen und Kaninchen gefunden. 3) Abweichende Konzentrationen von Cytochrom P-450 in Mikrosomen von neugeborenen Tieren oder nach Vorbehandlung von Ratten mit Phenobarbital, Methylcholanthren (MC) oder CoCl2 bewirkten ähnliche, aber nicht proportionale Änderungen der covalenten Bindungen an Protein und Lipid. Die Absorptionsdifferenz von reduzierten Lebermikrosomen von MC-vorbehandelten Ratten mit Cytochrom P-448 lag nach Zugabe von CCl4 bei 452. Die covalenten Bindungen mit solchen Mikrosomen waren ebenfalls erhöht. Die geringe Beschleunigung derirreversiblen Bindungen mit Lebermikrosomen von Ratten nach Vorbehandlung mit Isopropanol steht jedoch in keinem Verhältnis zu dem starken Anstieg der Toxicität von CCl4. 4) In Mikrosomenansätzen wurde praktisch keine Bindung an zugesetztes lösliches Albumin oder an RNS beobachtet. Jedoch wird 14C an Nicotin-Adenin-Dinucleotide des NADPH-Systems gebunden. Alle Haloalkane bewirkten eine ähnliche Beschleunigung der NADPH-Oxidation bei der Inkubation von Kaninchen-Lebermikrosomen und NADPH.
Notes:
Summary 1) After intraperitoneal injection of labeled CCl4, CHCl3, and halothane in mice, 14C is preferentially bound to liver endoplasmic protein and lipid. A considerable activity is also associated with mitochondrial constituents. Maximal protein binding (nmol/mg): CCl4: 2.8 (0.5 hrs); CHCl3: 11.5 (6 hrs); halothane: 5 (6 hrs). Lipid binding: CCl4: 6.4 (5 min); CHCl3: 8 (4 hrs); halothane: 13.5 (2 hrs). The form of the binding curves in microsomal and mitochondrial protein and lipid differed with the individual haloalkanes. 2) The irreversible (covalent) binding of 14C from labeled haloalkanes in anaerobic suspensions of isolated rabbit liver microsomes and NADPH after 30 min was for protein (lipid) (nmol/mg): CCl4: 15 (58); CHCl3: 3.4 (3.2); halothane: 2.3 (10); trichlorofluoromethane: 6.5 (30). Anaerobic incubation favored dehalogenation, but CHCl3 metabolism and irreversible binding requires oxygen. The greatest differences in the in vitro “covalent” binding rates were observed with CHCl3 in rat, mouse, and rabbit. 3) Altered microsomal cytochrome P-450 concentrations in newborn animals, or produced by pretreatment of rats with phenobarbital, 3-methylcholanthrene (MC), or CoCl2 effected similar, but not proportional changes in the rates of irreversible protein and lipid binding. Upon addition of CCl4 the difference of light absorption of reduced liver microsomes from MC-pretreated rats containing cytochrome P-448 appeared at 452 nm. The irreversible binding rate in these microsomes was also increased. The small acceleration in irreversible binding in liver microsomes from rats pretreated with isopropanol is not proportional to the high increase of CCl4 toxicity. 4) Practically no binding to added, soluble albumin or RNA was observed in microsomal incubates. However, 14C is bound to the nicotine-adenine dinucleotides of the NADPH system. All haloalkanes produced a similar increase of NADPH oxidation in incubates of rabbit liver microsomes and NADPH.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF00353849
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