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    Springer
    Monatshefte für Chemie 112 (1981), S. 1099-1102 
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): Enzymatic peptide synthesis ; Thermitase
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Notizen: Abstract The utility of thermitase, a thermophilic proteolytic enzyme fromThermoactinomyces vulgaris, as a catalyst for peptide synthesis has been studied using several Nα-benzyloxycarbonyl dipeptide esters as carboxyl components and Leu-NH2 as nucleophile. Couplings were most successful with substrates containing Met, Leu, Ala, Phe, Tyr in P1-position, and Val, Ala, Pro in P2, whereas the substrates with Val, Ile, Pro in P1 failed to couple.
    Materialart: Digitale Medien
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  • 2
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    Springer
    Monatshefte für Chemie 117 (1986), S. 1195-1204 
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): Carboxamidomethyl ester as C-protecting group ; Enzymatic deprotection ; Peptide synthesis ; α-Chymotrypsin- and Papain-catalyzed peptide bond formation
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung Es wurden die Carboxamidomethylester (CAM-Ester) vonZ- undBoc-geschütztem Alanin und Phenylalanin hergestellt mit dem Ziel, ihre Eignung als Substrate für α-chymotrypsin- und papainkatalysierte Hydrolyse- sowie Peptidsynthesereaktionen zu untersuchen. Die leichte, unter milden Bedingungen und in Abhängigkeit von der Enzymspezifität erfolgende Abspaltung derCAM-C-Schutzgruppe wurde nachgewiesen. An Beispielen wird die proteasekatalysierte Synthese verschiedener Peptidderivate unter Verwendung vonCAM-Estern als C-und N-Komponenten in wäßrig-organischen Medien belegt. Die für die Umsetzungen benötigten Reaktionszeiten sind vergleichsweise gering.
    Notizen: Abstract Carboxamidomethyl esters (CAM esters) ofZ- andBoc-protected alanine and phenylalanine were prepared in order to investigate their usefulness as substrates for α-chymotrypsin- and papain-catalyzed hydrolysis and peptide synthesis reactions. The easy removal of theCAM-C-protecting group under mild conditions and dependent on the enzyme specificity was demonstrated. Examples are given for the protease-catalyzed synthesis of various peptide derivatives usingCAM esters as C- and N-components in aqueous-organic media. Comparatively short reaction times were observed.
    Materialart: Digitale Medien
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  • 3
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    Springer
    Monatshefte für Chemie 118 (1987), S. 1279-1288 
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): Enzymatic synthesis in biphasic systems ; Peptide synthesis ; α-Chymotrypsin
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung Die DipeptidderivateZ-Tyr-Leu-NH2 undMca-Tyr-Leu-NH2 wurden durch α-chymotrypsin-katalysierte Kupplung in biphasischen Systemen aus Puffer und Essigsäureethylester hergestellt. Im Vergleich zu einem rein wäßrigen Medium, in dem nahezu keine Synthese erfolgt, wird in einem biphasischen System die Synthesereaktion durch Extraktion des Dipeptids in die organische Phase wesentlich begünstigt. Es wurde der Einfluß verschiedener Reaktionsparameter, wie Pufferkonzentration, Reaktionszeit, Volumenverhältnis von organischer zu wäßriger Phase und Reaktandenkonzentration auf die Ausbeute anZ-Tyr-Leu-NH2 untersucht. Ein Austausch der hydrophobenZ-Gruppe gegen die hydrophilere Chloracetylgruppe führte zu besseren Dipeptidausbeuten bei höheren Reaktionsgeschwindigkeiten.
    Notizen: Abstract The dipeptide derivativesZ-Tyr-Leu-NH2 andMca-Tyr-Leu-NH2 were synthesized by α-chymotrypsin-catalyzed coupling reactions in solvent systems consisting of buffer and ethyl acetate. In comparison to a pure aqueous medium, in which only insignificant synthesis takes place, the product formation is greatly enhanced in a biphasic medium due to extraction of the dipeptide into the organic phase. The influence of several reaction parameters, such as buffer concentration, reaction time, volume ratio of organic and aqueous phase, and reagent concentration on the yield ofZ-Tyr-Leu-NH2 was investigated. Replacement of the hydrophobicZ-group by the more hydrophilic chloroacetyl group resulted in better dipeptide yields at higher reaction rates.
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  • 4
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): Enzymic synthesis in biphasic systems ; Peptide synthesis ; α-Chymotrypsin ; Papain ; Thermolysin ; Protected Eledoisin (6–11)-hexapeptide
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Notizen: Abstract Papain and α-chymotrypsin were used for the protease-catalyzed assembly ofBoc-protected eledoisin (6−11)-hexapeptide by (2+4)- and (3+3)-segment condensation, respectively, in aqueous-organic solvent systems. As C-components, chemically synthesizedBoc-protected peptide methyl esters were employed. The nucleophilic tetrapeptide amide was prepared by papain-catalyzed (2+2)-segment coupling, while theZ-protected C-terminal dipeptide amide could be obtained by α-chymotrypsin- and thermolysin-catalyzed peptide bond formation. In addition, the influence of various reaction conditions, such as solvent composition, nucleophile concentration and reaction time, on the yield of theBoc-protected eledoisin (6−11)-hexapeptide was determined.
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  • 5
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): Chymotrypsin ; Enzymatic peptide synthesis ; Liquid phase peptide synthesis ; Solubilizing protective groups ; Polyoxyethylene
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Notizen: Abstract The utility of amino acids and dipeptides esterified to solubilizing polyoxyethylene supports as substrates for protease-mediated peptide bond formation was studied using free and immobilized α-chymotrypsin as a catalyst. Poor yields were obtained with Nα-protected amino acid or dipeptide polyoxyethylene esters as carboxyl components, most probably due to a shielding of the active site of the acyl enzyme intermediate by the polymer favouring hydrolytic cleavage. Experiments with polyoxyethylene esters as nucleophiles gave good results with free chymotrypsin, immobilized chymotrypsin predominantly caused hydrolysis of the ester carboxyl component due to unfavourable interactions between the soluble and insoluble polymers.
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  • 6
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    Springer
    Monatshefte für Chemie 112 (1981), S. 1165-1173 
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): Enzymic synthesis in biphasic systems ; Papain-catalyzed peptide bond formation ; Peptide synthesis
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Notizen: Abstract Several model peptides have been synthesized enzymatically using papain as a catalyst in biphasic aqueous-organic systems. The effect of different cosolvents,pH, buffer concentration, and reaction time on the papaincatalyzed synthesis was examined. A comparison of the results obtained indicates that water-immiscible organic solvents provide higher yields than methanol in papain mediated peptide synthesis with carboxyl components in the carboxyl free form. Furthermore, it could be established that papaincatalyzed peptide synthesis can be considerably speeded up by employing acyl peptide esters instead of acyl peptides. The former should promote the rapid formation of the acyl-enzyme intermediate.
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  • 7
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    Springer
    Monatshefte für Chemie 112 (1981), S. 469-481 
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): Biphasic aqueous-organic solvent mixtures ; α-Chymotrypsin ; Immobilized enzymes ; Peptide synthesis
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung Kovalent an Kieselgel, Enzacryl AA und Enzacryl AH gebundenes α-Chymotrypsin katalysiert die Peptidbindungsknüpfung zwischen N-geschützten Dipeptid-Methylestern und H-Leu-NH2 mit ähnlichen Ergebnissen wie das freie Enzym. Es wird gezeigt, daß mit Wasser mischbare und nichtmischbare Lösungsmittel, die Trägermaterialien sowie die Struktur der Substrate den Verlauf der Chymotrypsin-katalysierten Kupplungsreaktionen beeinflussen. Die besten Ausbeuten wurden in wäßrig-organischen Zweiphasen-systemen mit Kieselgel-gebundenem Chymotrypsin und mit Substraten mit Leucin in P2-Position erhalten. Die Syntheseausbeuten werden in bezug auf die Reaktivität von Substraten ähnlicher Struktur bei der enzymatischen Hydrolyse diskutiert. Alle immobilisierten Chymotrypsin-Präparationen konnten mit Erfolg für weitere Kupplungsreaktionen wiedergenutzt werden.
    Notizen: Abstract α-Chymotrypsin covalently bound to silica, enzacryl AA, and enzacryl AH catalyzes peptide bond formation between N-protected dipeptide methyl esters and H-Leu-NH2 with results similar to those with the free enzyme. The influence of water-miscible and water-immiscible cosolvents, of the supports, and of the structure of the substrates is shown to be of importance for the ease of the chymotrypsin-medicated coupling reactions. The best yields were obtained using biphasic aqueous-organic solvent mixtures, silica-bound chymotrypsin, and substrates with leucine in the P2-position. The yields of the syntheses are discussed in terms of the reactivity of substrates with similar structure in enzymatic hydrolyses. All the immobilized chymotrypsin preparations could be re-utilized successfully for further couplings.
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  • 8
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    Springer
    Monatshefte für Chemie 113 (1982), S. 331-337 
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): α-Chymotrypsin ; Enzymatic peptide synthesis ; Papain ; Solidphase peptide synthesis ; Thermolysin
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung Thermolysin, α-Chymotrypsin und Papain wurden als Biokatalysatoren für die Kupplung verschiedener Carboxylkomponenten an kieselgel-gebundenes Leucinamid als Nucleophil eingesetzt. Für erfolgreiche Kupplungen war eine Spacerlänge von 21 kovalenten Bindungen entsprechend 7 Aminosäureresten erforderlich. Diese Synthesevariante eröffnet die Möglichkeit, racemisierungsfreie Segmentkondensationen an unlöslichen polymeren Trägern mit Hilfe von Proteasen durchzuführen.
    Notizen: Abstract Thermolysin, α-chymotrypsin, and papain were used as biocatalysts for the coupling of several carboxyl components to silica-supported leucine amide as a nucleophile. A spacer length of 21 covalent bonds corresponding to 7 amino acid residues was required for successful coupling. This approach offers the possibility of using proteases for racemization-free segment condensations on insoluble polymeric supports.
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  • 9
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    Springer
    Monatshefte für Chemie 114 (1983), S. 571-579 
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): Enzymic synthesis in biphasic systems ; Pepsin-catalyzed peptide bond formation ; Peptide synthesis
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Notizen: Abstract The usefulness of biphasic aqueous-organic solvent systems for pepsin-catalyzed synthesis of model peptidesZ-X-Phe-Phe-OMe (X=Ala, Gln, Leu) has been demonstrated by coupling the correspondingZ-X-Phe-OH with H-Phe-OMe. The influence of various organic solvents on pepsin activity was examined. Some examples are given for the influence of nucleophile and enzyme concentration, bufferpH and organic solvent portion on product yield. Tetrachloromethane and mixtures of ethyl acetate/n-hexane proved to be especially useful allowing syntheses in good yields and within comparatively short reaction times of 2–6 hours.
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  • 10
    ISSN: 1434-4475
    Schlagwort(e): Carboxypeptidase Y catalyzed peptide bond formation ; Enzymic synthesis in biphasic systems ; Peptide synthesis
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Chemie und Pharmazie
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung Carboxypeptidase Y katalysiert in einem Zweiphasensystem aus Tetrachlormethan und Carbonatpuffer die Reaktion vonZ-Phe-OMe und verschiedenenZ- undBoc-geschützten Dipeptidmethylestern mit Val-NH2 bzw. Leu-NH2. Nach diesem Verfahren werden die entsprechenden N-geschützen Tripeptidamide in präparativem Maßstab hergestellt. Bei einem Substrat-Nucleophil-Verhältnis von nur 1:2 oder 1:3 erhält man die Peptidderivate in Ausbeuten von 56–97%.
    Notizen: Abstract Carboxypeptidase Y catalyzes in a biphasic system containing carbon tetrachloride and carbonate buffer the reaction ofZ-Phe-OMe and variousZ-andBoc-protected dipeptide methyl esters with Val-NH2 and Leu-NH2, respectively. This method has been applied to the synthesis of the corresponding N-protected tripeptide amides on a preparative scale. Using a substrate—nucleophile ratio of only 1:2 or 1:3 the peptide derivatives are obtained in yields of 56–97%.
    Materialart: Digitale Medien
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