ISSN:
1432-0584
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Medicine
Description / Table of Contents:
Summary A simple method is proposed for preparing hematologic material for pulse cytophotometry, including 1) treatment for hemolysis of up to 1 ml heparinized blood or aspirated bone marrow in 10 ml of tap water for 20 minutes, 2) storing of the suspension at +6°C after dilution in ethanol (35%), 3) staining of 1 ml of this dilution in 20 ml ethidiumbromide (10 mg/1000 ml saline) for 20 min and measuring at a rate of 500 cells per sec. Disturbing effects by red cells and by clustering of nucleated cells are avoided by this procedure. The registration of DNA-histograms of high accuracy in measurement is possible within 1 hr. The coincidence rate does not exceed 1% of the cells. Resulting from the three years experience in a hematologic laboratory the technic described is very useful especially for the possibilities of pulse cytophotometry in clinical routine and in the control and arrangement of leukemia treatment.
Notes:
Zusammenfassung Aus dreijähriger Erprobung in einem klinisch hämatologischen Labor ergab sich eine einfache Methode der Zellpräparation von Blut und Knochenmark, mit der die Impulszytophotometrie zur Gewinnung von DNS-Histogrammen als Routineverfahren möglichst ausgenutzt wird. Ein Hauptziel der Autoren ist dabei die kurzfristige Kontrolle von zellkinetischen Effekten der Leukämiebehandlung für Wahl und Zeitpunkt der weiteren Therapie. 0,5 bis 1 ml heparinisiertes Venenblut oder Sternalpunktat werden zur Hämolyse für 20 min in 10 ml Leitungswasser suspendiert. Die Probe kann in 35% Äthanol im Kühlschrank aufbewahrt werden. Nach 20 bis 30 min Färbung von 1 ml der Probe in 20 ml Ethidiumbromidlösung (10 mg/l phys. Kochsalzlösung) erfolgt die Messung von 500 Zellen/sec. Einflüsse durch Erythrozyten, Zellverklebungen und eine Koinzidenzrate von mehr als 1% der Zellen werden vermieden. Das DNS-Histogramm 1 h nach Entnahme der Probe vom Patienten ergibt genaue Werte der Anteile von Zellen in Stadien der Proliferation bzw. der S-Phase und (G2+M)-Phase.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF01615888
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