Skip to main content
Log in

Fluoreszenzzytophotometrische Bestimmung der Zellkern-DNS

Eine Gegenüberstellung der Akriflavin-Feulgen- und der Ethidiumbromid-Färbereaktion

Fluorescence cytophotometric determination of nuclear DNA

Comparative study of the acriflavine-feulgen and the ethidiumbromide staining reactions

  • Published:
Histochemie Aims and scope Submit manuscript

Summary

Acriflavine-Feulgen (Böhm und Sprenger, 1968) and ethidiumbromide fluorescence after previous pepsin digestion (Göhde et al., 1971) yield corresponding DNA distribution patterns when applied to liver smears. With the time-consuming acriflavine staining (220 min) the cellular morphology is best preserved and the stained specimen may be stored for long periods.

The rapidly obtainable ethidiumbromide staining (70 min) results in a selective fluorescence of DNA only after heavy alteration of the cellular morphology by pepsin digestion. Storage of the material is only possible for two days. The heavily altered cellular morphology, however, is rather unfavorable for prescreening in automated cytology. Specimens that were found to be suspicious are no longer suitable for conventional cytological diagnosis, because they have lost their cytoplasm and nuclear chromatin structure.

Zusammenfassung

Die Akriflavin-Feulgen-Färbung (Böhm und Sprenger, 1968) und die Ethidiumbromid-Fluorochromierung nach vorausgehender Pepsinbehandlung (Göhde et al., 1971) ergeben an Leberzellausstrich-Präparaten weitgehend gleichartige DNS-Häufigkeitsverteilungen. Bei der zeitlich aufwendigen (220 min) Akriflavin-Färbung ist eine optimale Darstellung der Zellmorphologie und eine jahrelange Archivierung der Ausstrichpräparate möglich.

Die rasch durchführbare Ethidiumbromid-Färbung (70 min) bietet nur nach schwerer Alteration der Zellmorphologie durch die vorausgehende Pepsinbehandlung eine selektive Darstellung der DNS. Eine Archivierung von Ausstrichpräparaten ist nur für 2 Tage möglich. Die schwere Alteration der Zellmorphologie ist besonders bei durchflußphotometrischen Prescreeninguntersuchungen in der gynäkologischen Krebsvorsorge nachteilig. Zellpopulationen, die zu einer zytophotometrischen Verdachtsdiagnose geführt haben, sind durch Verlust des Zytoplasmas und der Kernstruktur einer konventionellen morphologischen Diagnostik nicht mehr zugängig.

This is a preview of subscription content, log in via an institution to check access.

Access this article

Price excludes VAT (USA)
Tax calculation will be finalised during checkout.

Instant access to the full article PDF.

Similar content being viewed by others

Literatur

  • Böhm, N., Sprenger, E.: Fluorescence cytophotometry: A valuable method for the quantitative determination of nuclear Feulgen-DNA. Histochemie 16, 100–118 (1968).

    Article  PubMed  Google Scholar 

  • Böhm, N., Roka, S., Sprenger, E., Wagner, D.: Absorptions- und fluoreszenzzytophotometrische DNS-Bestimmungen an vaginalzytologischem Material. Acta histochem. (Jena) Suppl. X, 233–242 (1971).

    Google Scholar 

  • Dittrich, W., Göhde, W.: Impulsfluorometrie bei Einzelzellen in Suspension. Z. Naturforsch. 24b, 360 (1969).

    Article  Google Scholar 

  • Feulgen, F., Rossenbeck, H.: Der mikroskopisch-chemische Nachweis einer Nucleinsäure vom Typus der Thymusnucleinsäure und darauf ruhende elektive Färbung von Zellkernen in mikroskopischen Präparaten. Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem. 135, 203–248 (1924).

    Article  CAS  Google Scholar 

  • Göhde, W., Dittrich, W.: Impulsfluorometrie — ein neuartiges Durchflußverfahren zur ultraschnellen Mengenbestimmung von Zellinhaltstoffen. Acta histochem. (Jena) Suppl. X, 429–437 (1971).

    Google Scholar 

  • Göhde, W., Dittrich, W., Severin, E., Reiffenstuhl, G., Will, C.: The technique of “Impulscytophotometry” of cervical and vaginal smears. Presented at the Fourth International Congress of Cytology. London 1971.

  • Graumann, W.: Zur Standardisierung des Schiffschen Reagens. Z. wiss. Mikr. 61, 225–226 (1953).

    Google Scholar 

  • Haag, D., Tschahargane, C., Goerttler, Kl.: Über die Eignung von Ethidiumbromid als Fluorochrom zur quantitativen Darstellung von Nukleinsäure in histologischen Präparaten. Histochemie 27, 119–124 (1971).

    Article  CAS  PubMed  Google Scholar 

  • Kasten, F. H.: Schiff-type reagents in cytochemistry. Histochemie 1, 466–509 (1959).

    Article  CAS  PubMed  Google Scholar 

  • Pecq Le, J.-B., Paoletti, C.: A new fluorometric method for RNA and DNA determination. Analyt. Biochem. 17, 100–107 (1966).

    Article  CAS  PubMed  Google Scholar 

  • Prenna, G., Bianchi, U. A.: Reazioni di Feulgen fluorescenti e loro possibilità citofluorometriche quantitative. 5. Citofotometrica quantitativa in fluorescenza ed in assorbimento della reazioni di Feulgen eseguita con Acriflavina-SO2. Riv. Istoch. norm. pat. 10, 667–676 (1964).

    Google Scholar 

  • Ruch, F., Bosshard, U.: Photometrische Bestimmung von Stoffmengen im Fluoreszenzmikroskop. Z. wiss. Mikr. 65, 335–341 (1963).

    CAS  PubMed  Google Scholar 

  • Sprenger, E., Böhm, N.: Eine Möglichkeit automatisierter Meßwerterfassung in der Fluores-zenzzytophotometrie. Acta histochem. (Jena) Suppl. X, 243–246 (1971).

    Google Scholar 

  • Sprenger, E., Böhm, N., Sandritter, W.: Durchflußfluoreszenzcytophotometrie für ultraschnelle DNS-Messungen an großen Zellpopulationen. Histochemie 26, 238–257 (1971a).

    Article  CAS  PubMed  Google Scholar 

  • Sprenger, E., Sandritter, W., Böhm, N., Schaden, M., Hilgarth, M., Wagner, D.: Durch-flußfluoreszenzzytophotometrie: Ein Prescreeningverfahren für die gynäkologische Zytodiagnostik. Beitr. Path. Anat. 143, 323–344 (1971b).

    CAS  Google Scholar 

Download references

Author information

Authors and Affiliations

Authors

Additional information

Mit Unterstützung durch das Bundesministerium für Jugend, Familie und Gesundheit.

Rights and permissions

Reprints and permissions

About this article

Cite this article

Sprenger, E., Böhm, N., Schaden, M. et al. Fluoreszenzzytophotometrische Bestimmung der Zellkern-DNS. Histochemie 30, 255–267 (1972). https://doi.org/10.1007/BF00277596

Download citation

  • Received:

  • Published:

  • Issue Date:

  • DOI: https://doi.org/10.1007/BF00277596

Navigation