Untersuchungen zur physiologischen Bedeutung der Neuraminsäure-haltigen Kohlenhydratgruppe von „Intrinsic-Factor“-Mucoiden menschlicher Magenschleimhaut

Zusammenfassung

Die Einwirkung von Pepsin, Trypsin und Neuraminidase sowie von Pepsin und Trypsin nach vorangegangener Neuraminidasebehandlung auf hoch gereinigte „Intrinsic Factor“-(IF-) Mucoide des Corpus fundus-Bereiches menschlicher Magenschleimhaut wurde untersucht. Zur Bestimmung der physiologischen Aktivität wurden erstens der Urinexkretionstest (UE) an Patienten mit perniziöser Anämie oder totaler Gastrektomie, zweitens ein in vitro-Test unter Benutzung des Homogenates aus Meerschweinchen-Intestinal-Mucosa (MIMH) und drittens ein Vitamin B₁₂-Bindungstest mit Dialysetech nik angewandt. Pepsin und saures Milieu zerstören die meßbare physiologische Aktivität des IF in allen drei Testen. Trypsin hingegen führt zu stärkerem Aktivitätsverlust, erkennbar im MIMH-Test, nur nach vorangegangener Neuraminidase-Behandlung. Neuraminidase allein ergibt nur eine im UE-Test erkennbare Aktivitätsminderung. Die enzymatisch dabei abgespaltene N-Acetyl-neuraminsäure, die selbst keine IF-Aktivität zeigt, kann durch einen sauren Kationenaustauscher ersetzt werden. Danach erweisen sich die IF-Mucoide auch im UE-Test wieder als wirksam. Dies zeigt, daß die N-Acyl-neuraminsäure ähnlich wie der Kationenaustauscher das IF-aktive Protein gegen Trypsin schützt. Mit Ausnahme von Pepsin und saurem Milieu beeinflussen die genannten Enzyme die B₁₂-Bindungskapazität nicht. Andere, IF-inaktive Mucoide (menschliches Harnmucin und Erythrocytenstroma-Mucoid) weisen ebenfalls B₁₂-Bindungsfähigkeit auf, die durch Neuraminidase-Behandlung sogar geringfügig verstärkt wird.

Summary

The effect of pepsin, trypsin and neuraminidase, as well as pepsin and trypsin previously treated with neuraminidase against highly purified “intrinsic factor” (IF)-mucoid from the corpus-fundus region of human gastric mucosa has been investigated. In order to determine the physiological activity of enzymatically treated IF-mucoids three tests have been performed: 1. the urinary excretion test (UE) of patients with established pernicious anaemia or total gastrectomie, 2. an in vitro test using an homogenate of guinea pig intestinal mucosa (GPIMH) and 3. the vitamin B₁₂-binding-test using a dialysis technique. Pepsin and acid pH destroyed all measurable physiological activity of the IF in all 3 tests. The effect of trypsin against IF-mucoid, as measured by the UE-and GPIMH-tests could be extensively reduced after a preceding treatment of this mucoid with neuraminidase. A discernible inactivation by neuraminidase alone was restricted to the UE-test. N-acetyl-neuraminic acid, enzymatically split off from IF-mucoids, shows no IF-activity. It can be replaced by an acidic cation-exchanger. After replacement the activity of IF-mucoids in the UE-test is regained. This led to the conclusion that N-acetyl-neuraminic acid protects the IF-effective protein against trypsin in the same way as accomplished by a cation-exchanger. Apart from pepsin and acid pH, the above enzymes have no influence on the B₁₂-binding activity of IF-mucoids. Other, IF-inactive, mucoids such as human urinary mucoid and erythrocyte-stroma-mucoids also show a B₁₂-binding activity, which can be slightly increased after treatment with neuraminidase.