A rapid method for detecting barbiturates in serum using EI-SIM

Abstract

A simple and rapid method for analysis of barbiturates in serum has been developed. In order to extract and clean barbiturates in serum, a separation column packed with Extrelut and Florisil was used, and the eluate was directly analyzed by means of electron impact selected ion monitoring (EI-SIM). Selected ions used were base peak ions of 10 barbituartes, and the internal standard used was allobarbital or secobarbital. The calibration curves were linear over the range 0.5–5 ng. Extraction of replicate serum samples containing 20 μg/1.5 ml and 5 μg/1.5 ml resulted in a recovery of 87.2–105.2% and 81.6–104.6%, respectively, with the exception of phenobarbital, which was 151.9% and 172.1%, respectively. Secobarbital was also analyzed in the serum of 13 patients who had been given secobarbital intravenously. In 3 out of 10 cases, Secobarbital levels greater than 1 μg/ml were detected more than 72 h after administration. This method seems to have possibilities for clinical use.

Zusammenfassung

Eine einfache und schnelle Methode zur Analyse von Barbituraten im Serum wurde entwickelt. Zur Probenaufarbeitung wurde eine Säulenextraktion mit Hilfe von Extrelut und Florisil angesetzt. Das Eluat wurde direkt analysiert mit Hilfe der GC/MS (EI-SIM). Als Ionen wurden die „base peaks” von 10 verschiedenen Barbituraten ausgewählt. Als interner Standard wurde Allobarbital oder Secobarbital verwendet. Innerhalb eines Bereiches von 0,5–5 ng wies die Eichkurve einen linearen Verlauf auf. Bei der Extraktion von gespeikten Serumproben, welche 20 μ1,5 ml und 5 μ1,5 ml enthielten, konnte eine Wiederfindungsrate von 87,2–105,2% und 81,6–104,6% gefunden werden. Phenobarbital stellt mit einer Wiederfindungsrate von 151,9% bzw. 172,1% eine Ausnahme dar. Die Secobarbital-Gehalte von 13 Patienten-Seren nach intravenöser Gabe von Secobarbital wurden analysiert. In 3 von 10 Fällen konnten Secobarbital-Spiegel von mehr als 1 μg/ml bei mehr als 72 Stunden zurückliegender Secobarbital-Gabe nachgewiesen werden. Die Methode scheint eine Möglichkeit zur klinischen Barbiturat-Spiegel-Bestimmung zu bieten.