Die Veränderungen der Michaelis-Konstanten des Pepsins und Trypsins mit verschiedenen bestrahlten Proteinen und die chromatographische und elektrophoretische Trennung der proteolytisch entstandenen Spaltprodukte

Zusammenfassung

Vier verschiedene Proteine, Human- und Rinderalbumin, γ-Globulin vom Rind und Ovalbumin wurden in wäßriger Lösung im Elektronenaccelerator nachvan de Graaf mit 0,1 bis 30 Mrad bestrahlt. Von den so verschieden behandelten Eiweißen untersuchten wir die Michaelis-Konstanten des Pepsins und Trypsins nachLinewaever undBurk.

Bei dem Human- und Rinderalbumin kommt es bis zu einer Strahlendosis von 5 Mrad zu einem Abfall derK _m -Werte beider Enzyme, bei höheren Dosen zu einem deutlichen Anstieg. Bei dem γ-Globulin und Ovalbumin steigen schon bei 0,1 Mrad die Michaelis-Konstanten an.

Daneben untersuchten wir agarelektrophoretisch und chromatographisch an Sephadex G 25 die durch Pepsin entstandenen Bruchstücke der einzelnen Proteine.

Dabei kommt es beim Human- und Rinderalbumin bei niederen Strahlendosen zu einer Zunahme der niedermolekularen Fragmente, bei höheren Dosen nehmen sie ab. Bei dem γ-Globulin sehen wir schon bei 1 Mrad eine Abnahme der hydrolysierten Bruchstücke zugunsten des nicht gespaltenen Eiweißes.

Summary

Four different proteines, humane — and bovine albumine, bovine gamma-globuline and ovalbumine were irradiated in aqueous solution with 0,1—30 Mrad in an electron accelerator typevan de Graaf. From these treated proteines we determined the Michaelis-constants of pepsine and trysine according toLineweaver andBurk. Up to the dosis of 5 Mrad we found with humane and bovine albumine a decrease of the constants of both encymes, increasing the dosis of radiation the constant ascended. In contrast of these results, the constants of pepsine and trypsine increased with bovine gamma globuline and ovalbumine as early as the dosis of 0,1 Mrad.

Moreover we analysed the fragments of the irradiated proteines formed by hydrolysis with pepsine by agarelectrophoresis and chromatography on Sephadex G 25.

With humane and bovine Albumine we found up to the dosis of 5 Mrad an increase of low-molecular fragments, they decreased after treatment with 10–30 Mrad. The bovine gamma globuline show a decrease of the low molecular fragments in favour of the non hydrolysed proteine at the dosis of 1 Mrad.