Untersuchungen zur Pathogenese der diabetischen Mikroangiopathie

Zusammenfassung

Es wird eine Methode beschrieben, mit der Glomerula mit Hilfe von Sieben verschiedener Maschenweite innerhalb von 30 min aus Rattennieren isoliert werden können. Die erhaltenen Glomerula sind fast rein (5% Verunreinigung durch Tubuli) und zeigen über mindestens 2 1/2 Std eine konstante Stoffwechselaktivität. Dafür sprechen der lineare O₂-Verbrauch, die¹⁴CO₂-Produktion aus U-¹⁴C-Glucose und der lineare Einbau von¹⁴C aus U-¹⁴C-Glucose in die Basalmembran. Die Basalmembranen können nach der Inkubation mit Ultraschall leicht von den Glomerula abgetrennt werden und sind bei elektronenoptischer Kontrolle weitgehend rein. Die Methode gestattet es, Stoffwechseluntersuchungen auch an der Basalmembran durchzuführen.

Summary

A method is described by which glomeruli can be isolated with the aid of sieves of varying mesh within 30 min. The isolated glomeruli are obtained as an almost pure fraction (contamination 5% tubuli) and showed a constant metabolic activity over a period of 2 1/2 hour, which was demonstrated by the linear O₂-consumption,¹⁴CO₂-production, and incorporation rates of¹⁴C from U-¹⁴C-glucose into the basement membrane. After incubation, the basement membranes can be easily isolated by sonification. The basement membranes were controlled by electron microscopy. This method allows metabolic studies on basement membranes.