Leuko- und Thrombophorese bei Gesunden mit dem NCI-IBM Blutzellseparator

Summary

In normal subjects the maximum yield of platelets, lymphocytes and granulocytes, and the optimum degree of purity in regard to the other blood cells was examined by separation with the NCI-IBM blood cell separator. 40 centrifugations were carried out with blood from 15 normal subjects. For anticoagulation ACD was used exclusively. First, the distribution of the cells in the centrifuge depending on g-forces was calculated. The best layer and the most suitable g-force were evaluated for the yield of cells and the degree of purity. Platelets and lymphocytes could be withdrawn from the buffy coat at 1750 rpm (220 g). Granulocytes could be withdrawn from the outer layer of red blood cells at 1750 (220 g). Under these conditions the yield of platets was 4.8×10¹¹ (withdrawal time 2 hours, degree of purity platelets: red blood cells=1:0.0003; platelets:lymphocytes=1:0.007; platelets:granulocytes=1:0.0004). The yield of lymphocytes was 3.55×10⁹ (withdrawal time 2 hours, degree of purity lymphocytes:red blood cells=1:0.3; lymphocytes:granulocytes=1:0.03; lymphocytes:platelets=1:100). The number of granulocytes was 1.5×10⁹ (withdrawal time 30 min, degree of purity granulocytes:platelets=1:2; granulocytes:lymphocytes=1:0.01). A separation of granulocytes from red blood cells was not possible with the method applied.

Zusammenfassung

Bei der Blutzellisolierung mit dem NCI-IBM-Zellseparator wurde an Normalpersonen die maximale Ausbeute an Thrombocyten, Lymphocyten und Granulocyten sowie der optimale Reinheitsgrad gegenüber anderen Blutzellen untersucht. Insgesamt wurden 40 Zentrifugationen an 15 Normalpersonen durchgeführt. Die Anticoagulierung erfolgte ausschließlich mit ACD. An Stichproben wurde die Zellverteilung in der Zentrifuge in Abhängigkeit von der Drehzahl bestimmt und daraus die für Zellausbeute und Reinheitsgrad günstigste Entnahmeschicht und Zentrifugendrehzahl ermittelt. Als günstigste Bedingungen ergaben sich zur Gewinnung von Thrombocyten die Entnahme aus der Leukocytenschicht bei 1 750 Upm (220 g), zur Gewinnung von Lymphocyten ebenfalls dic Entnahme aus der Leukocytenschicht bei 1 750 Upm (220 g) und zur Gewinnung von Granulocyten die Entnahme aus der äußersten Erythrocytenschicht bei 1 750 Upm (220 g). Mit diesen Bedingungen wurden Dauerentnahmen von Thrombocyten, Lymphocyten und Granulocyten vorgenommen. Die Thrombocytenausbeute betrug 4,8×10¹¹ (Entnahmedauer 2 Std, Reinheitsgrad Thrombocyten : Erythrocyten=1:0,0003; Thrombocyten:Lymphocyten=1:0,007; Thrombocyten : Granulocyten=1:0,0004). Die Lymphocytenausbeute betrug 3,55×10⁹ (Entnahmedauer 2 Std, Reinheitsgrad Lymphocyten : Erythrocyten=1:0,3; Lymphocyten : Granulocyten=1:0,03; Lymphocyten : Thrombocyten=1:100). Die Ausbeute an Granulocyten war 1,5×10⁹ (Entnahmedauer 1/2 Std, Reinheitsgrad Granulocyten : Thrombocyten=1:2; Granulocyten : Lymphocyten=1:0,01). Eine Trennung der Granulocyten von den Erythrocyten war bei der angewandten Methode nicht möglich.