Fraktionierte Zellextraktion zur Differenzierung cytoplastischer, mitochondrialer und lysosomaler Enzyme der Leber

Summary

Enzymes of extramitochondrial, mitochondrial and lysosomal origin were differentiated by the method of fractional tissue extraction from rat liver. It could be confirmed that soluble enzymes of the extramitochondrial (cytoplasmatic) compartment (glycerine aldehydphosphate-dehydrogenase, argininosuccinate lyase) and soluble enzymes of the mitochondrial matrix can be differentiated easily according to their different intracellular localisation. Additionally, our results emphasize that soluble enzymes of both compartements and marker-enzymes of the lysosomal cell space which are known to be structurally-bound, can be differentiated too. However, the method failed to establish significant differences between enzymes located in the submitochondrial compartment (adenylatekinase, monaminooxidase and succinic-dehydrogenase) and lysosomal enzymes (cathepsin-D and N-acetyl-D-glucosaminidase).

Zusammenfassung

Am Modell der Rattenleber wurde die fraktionierte Zellextraktion zur Differenzierung von Enzymen extramitochondrialen, mitochondrialen und lysosomalen Ursprungs angewandt.

Mit dieser Methode ist eine Trennung löslicher Enzyme des extramitochondrialen Zellabschnittes (Glycerinaldehydphosphatdehydrogenase, Argininosuccinatlyase) von solchen der mitochondrialen Matrix (Glutamatdehydrogenase, Ornithin-Ketosäure-Transaminase) möglich. Darüber hinaus machen die Ergebnisse deutlich, daß auch die Marker-Enzyme des lysosomalen Zellabschnittes differenziert extrahiert und gemessen werden können.

Die gleichzeitige Bestimmung von strukturgebundenen Enzymen des submitochondrialen Zellabschnittes (Monaminooxidase, Adenylatkinase, Succinatdehydrogenase) und von strukturgebundenen lysosomalen Enzymen (Kathepsin D und N-Acetyl-D-Glucosaminidase) ergab, daß derartige Enzyme mit dem Verfahren der fraktionierten Zellextraktion nicht unterschieden werden können.