Summary
Specific activities are determined of two functional fractions of α-amanitin sensitive DNA-dependent RNA polymerases in nuclei from human normal and chronic lymphocytic leukemia lymphocytes. Specific activity of “free” RNA polymerase in CLL corresponds to 0.133 pmoles (3H)-UMP/106 cells as compared to 0.209 in normals. Activities of the “engaged” enzymes are 0.139 in CLL and 0.132 in normals. “Free” enzymes in NL and CLL are completely inhibited by 400 ng/ml Rifamycin AF/013, while the “engaged” enzymes exhibit 70% of their original activity. 1.0 ng/ml α-amanitin suppress 50% of the activity of the “free” enzyme in CLL. The “free” enzyme in NL and the “engaged” enzymes in NL and CLL do not show any residual activity in the presence of 1.0 ng/ml α-amanitin.
Zusammenfassung
Es werden die spezifischen Aktivitäten von zwei funktionell unterschiedlichen Fraktionen der α-Amanitin-inhibierbaren DNS-abhängigen RNS-Polymerase in Zellkernen normaler menschlicher Lymphocyten (NL) sowie von Lymphocyten bei chronischer lymphatischer Leukämie (CLL) bestimmt. Die Aktivität der „freien“ RNS-Polymerase bei CLL beträgt 0,133 gegenüber 0,209 pMol (3H)-UMP/106 Zellen in normalen Lymphocyten. Die Aktivitäten der „gebundenen“ Enzyme liegen bei 0,139 (CLL) bzw. 0,132 pMol (3H)-UMP/106 Zellen (NL). Durch 400 ng/ml Rifamycin AF/013 wird das „freie“ Enzym in NL und CLL völlig inhibiiert, während das „gebundene“ Enzym noch 70% seiner Aktivität aufweist. Da „freie“ Enzym in CLL-Lymphocyten wird durch 1,0 ng/ml α-Amanitin zu 50% inhibitiert, während dieses Enzym in NL sowie die „gebundenen“ Enzyme in NL und CLL zu mehr als 90% inaktiviert werden.
Literatur
Garbrecht, M., Mertelsmann, R., Schöch, G.: Untersuchung der DNS-abhängigen RNS-Polymerase aus menschlichen Leukocyten in einem einfachen zellfreien System. Klin. Wschr.51, 730–734 (1973)
Garbrecht, M., Mertelsmann, R.: DNS-abhängige RNS-Polymerasen in menschlichen Leukocyten. II. Unterschiedliche spezifische Aktivitäten der Polymerasen A und B bei akuten und chronischen Hämoblastosen und ihre mögliche prognostische Bedeutung. Klin. Wschr.53, 311–316 (1975)
Mertelsmann, R., Garbrecht, M., Reimer, R.: Partial Purification and properties of DNA-dependent RNA polymerases from human normal and chronic lymphocytic leukemia peripheral blood lymphocytes. Submitted for publication (1975)
de Pomerai, D.I., Chesterton, C.J., Butterworth, H.W.: Preparation of chromatin. Variation in the template properties of chromatin dependent on the method of preparation. Eur. J. Biochem.46, 461–471 (1974)
Yu, F.-L.: Two functional states of the RNA polymerases in the rat hepatic nuclear and nucleolar fractions. Nature251, 344–346 (1974)
Mertelsmann, R.: Purification and some properties of a soluble DNA-dependent RNA polymerase from nuclei of human placenta. Eur. J. Biochem.9, 311–318 (1969)
Heitbrock, H.W., Mertelsmann, R., Garbrecht, M.: Circadian rhythm of RNA polymerase B activity in human blood lymphocytes. Submitted for publication (1975)
Meillhac, M., Tysper, Z., Chambon, P.: Animal DNA-dependent RNA polymerases. 4. Studies on inhibition by Rifamycin derivatives. Eur. J. Biochem.28, 291–300 (1972)
Seifart, K.H., Benecke, B.J.: DNA-dependent RNA polymerase C. Occurrence and localization in various animal cells. Eur. J. Biochem.53, 293–300 (1975)
Weil, P.A., Blatti, S.P.: Partial purification and properties of calf thymus deoxyribonucleic acid dependent RNA polymerase III. Biochemistry14, 1636–1642 (1975).
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Mit Unterstützung der Deutschen Forschungsgemeinschaft (Ga 174, Me 469).
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Garbrecht, M., Mertelsmann, R. Freie und matrizen-gebundene RNS-Polymerase in normalen und leukämischen Lymphocyten. Klin Wochenschr 54, 235–237 (1976). https://doi.org/10.1007/BF01469131
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