Summary
Bioassay, using the rat hemidiaphragm and epididymal fat pad preparations, has been performed upon the plasma and upon a T.C.A.-ethanol extract of the plasma of fourteen newly diagnosed diabetics. Immunoassay of the extracts was also carried out. Both bioassay and immunoassay of three pooled T.C.A.-ethanol extracts (Dr. W.L. Ashton) were performed. — Five of thirteen plasmas tested showed insulin-like activity (ILA) on the hemidiaphragm, while all of fourteen tested on the fat pad showed ILA. In contrast, eleven of fourteen extracts revealed considerable amounts of ILA on the hemidiaphragm. Again, all the extracts revealed ILA upon the fat pad. Immunoreactive insulin was found in all extracts, but the levels of ‘insulin’ measured by this method were much lower than those measured by the fat pad assay. No extract showed significant antagonism to the effects of added insulin (1 mu/ml) on the hemidiaphragm. — Two of the pooled extracts contained very large amounts of both bioassayable and immunoreactive insulin. No one of the three, however, in our experiments, showed any significant antagonism to the effects of added insulin on the hemidiaphragm.
Résumé
Le dosage biologique, utilisant les préparations d'hémidiaphragme et de tissu adipeux de l'épididyme de rat, a été réalisé sur le plasma et sur un extrait par l'acide trichloracétique (T.C.A.)-éthanol du plasma de quatorze diabétiques récemment diagnostiqués. Le dosage immunologique des extraits a été également réalisé. A la fois, le dosage biologique et le dosage immunologique de trois ≪pools≫ d'extraits par le T.C.A.-éthanol (Dr. W.L. Ashton) ont été réalisés. — Cinq des treize plasmas testés montrèrent une activité insulinique (ILA) sur l'hémidiaphragme tandis que les quatorze plasmas testés sur le tissu adipeux montrèrent tous de l' ILA. Par contre, onze des quatorze extraits révélèrent des quantités considérables d'ILA sur l'hémidiaphragme. De plus, tous les extraits montrèrent une ILA sur le tissu adipeux. De l'insuline immunoréactive a été trouvée dans tous les extraits, mais les taux ≪d'insuline≫ mesurés par cette méthode étaient beaucoup plus bas que ceux mesurés par le dosage sur le tissu adipeux. Aucun extrait ne présentait d'antagonisme significatif pour les effets de l'insuline (1 mu/ml) ajoutée sur l'hémidiaphragme. — Deux des ≪pools≫ d'extraits contenaient de trés grandes quantités à la fois d'insuline biologiquement dosable et immunoréactive. Cependant aucun des trois extraits ne montrait dans nos expériences d'antagonisme significatif sur l'hémidiaphragme pour les effets de l'insuline ajoutée.
Zusammenfassung
Plasma und Plasma-Trichloressig-säure-Äthylalkohol-Extrakte von 14 frisch entdeckten Diabetikern wurde mit biologischen Insulinbestimmungsmethoden unter Verwendung des Rattenhemidiaphragms und des epididymalen Fettgewebes untersucht. Außerdem wurde die immunologische Insulinbestimmung der Extrakte durchgeführt. Drei „gepoolte” Trichloressig-säure-Alkohol-Bxtrakte (Dr. W.L. Ashton) wurden der biologischen und immunologischen Insulinbestimmung unterzogen. — Fünf der 13 getesteten Plasmen zeigten eine insulinähnliche Aktivität (ILA) am Hemidiaphragma, während alle 14 untersuchten Plasmen am Fettgewebe eine ILA aufwiesen. Im Gegensatz dazu ließen sich bei 11 von 14 Extrakten beträchtliche Mengen einer ILA am Zwerchfell nachweisen. Wieder zeigten alle Extrakte eine ILA am Fettgewebe. Immunologisch wirksames Insulin fand sich in allen Extrakten, doch lagen die mit dieser Methode gemessenen Insulinspiegel viel tiefer als die mit der Fettgewebsmethode bestimmten Werte. Kein Extrakt zeigte am Diaphragma eine signifikanten Antagonismus gegenüber der Wirkung zugefügten Insulins (1 mE/ml). — Zwei der „gepoolten” Extrakte enthielten sehr große Mengen biologisch und immunologisch bestimmten Insulins. Keiner der drei Extrakte zeigte jedoch in unseren Versuchen am Zwerchfell einen signifikanten Antagonismus gegenüber der Wirkung zugefügten Insulins.
Article PDF
Similar content being viewed by others
References
Alp, H., and L. Recant: Studies of the Insulin-inhibitory effect of human albumin fractions. J. clin. Invest. 44, 870–882 (1965).
Ashton, W.L.: The glucose uptake induced in rat hemidiaphragms by insulin in the presence of human albumin. J. Endocr. 33, 103–107 (1965).
Cameron, J.S., H. Keen and G. Menzinger: Insulin activity of normal plasma and plasma acid-ethanol extracts. Lancet 1964 I, 74–76.
Debro, J.R., H.E. Tarver and A. Korner: The determination of serum albumin and globulin by a new method. J. Lab. clin. Med. 50, 728–732 (1957).
Hales, C.N., and P.J. Randle: Immunoassay of insulin with insulin antibody precipitate. Lancet 1963 I, 790–791.
Keen, H.: Properties of human albumin. A metabolic study of albumin extracts from normal and diabetic plasma. Diabetes 12, 406–413 (1963).
J.S. Cameron and A.O. Lurie: A microincubation adipose tissue assay for insulin. Submitted for publication. (1966).
Morgan, C.R., and A. Lazarow: Immunoassay of insulin; a two antibody system. Diabetes 12, 115–126 (1963).
Peters, N., and C.N. Hales: Plasma insulin concentrations after myocardial infarction. Lancet 1965 I, 1144–1145.
Spellacy, W.N., F.C. Goetz, B.Z. Greenberg and J. Ells: Plasma insulin in normal mid-pregnancy. Amer. J. Obstet. Gynec. 92, 11–15 (1965).
Steinke, J., K.W. Taylor and A.E. Renold: Insulin antagonism in serum from normal persons and diabetics including some observations on pig's blood. Lancet 1961 I, 30–31.
Umbreit, W.W., R.H. Burris and J.F. Stauffer: Manometric techniques. Minneapolis. 4th Ed. 1964.
Vallance-Owen, J., E. Dennes and P.N. Campbell: Insulin antagonism in plasma of diabetic patients and normal subjects. Lancet 1958 II, 336–338.
— and W.L. Ashton: Cardiac infarction and insulin antagonism. Lancet 1963 I, 1226–1228.
— and M.D. Lilley: An insulin antagonist associated with plasma albumin. Lancet 1961a I, 804–806.
— and M.D. Lilley: Insulin antagonism in the plasma of obese diabetics and pre-diabetics. Lancet 1961b I, 806–807.
Author information
Authors and Affiliations
Rights and permissions
About this article
Cite this article
Cameron, J.S., Boyns, D.R., Jarrett, R.J. et al. The properties of trichloracetic acid-ethanol extracts of human plasma. Diabetologia 2, 86–90 (1966). https://doi.org/10.1007/BF00423015
Received:
Issue Date:
DOI: https://doi.org/10.1007/BF00423015