Summary
The influence exerted by the inactive support (charcoal-dextran) and the proteins in the medium, on the separation of free from antibody-bound125I-insulin by the charcoal-dextran insulin radioimmunoassay method was studied. The behavior of both fractions in the presence of different concentrations of albumin, dextran, normal guinea pig serum, and normal human serum was observed, and the conditions were established under which maximum charcoal adsorption of free insulin and minimum adsorption of bound insulin occur. The results obtained were compared with those yielded by the double antibody technique.— Under these working conditions it is possible to determine insulin in an unknown serum at 1/20 or 1/10 dilutions with a sensibility of 0.5 μU.
Résumé
Nous avons étudié l'influence exercée par le support inactif (charbon-dextran) et par les protéines dans le milieu sur la séparation de l'insuline libre de l'insuline125I liée aux anticorps par la méthode de dosage radioimmunologique de l'insuline au charbon-dextran. Nous avons observé le comportement des deux fractions en présence de différentes concentrations d'albumine, de dextran, de sérum normal de cobaye et de sérum humain normal, puis nous avons établi les conditions dans lesquelles se produisent d'une part, le maximum d'absorption d'insuline libre par le charbon, d'autre part, le minimum d'absorption d'insuline liée. Les résultats obtenus ont été comparés avec ceux qui ont été trouvés par la méthode des anticorps doubles. Dans ces conditions de travail, il est possible de déterminer l'insuline dans un sérum inconnu avec des dilutions de 1/20 et 1/10 et avec une sensibilité de 0.5 μU.
Zusammenfassung
Es wurde der Einfluß des inaktiven Trägers (Kohle-Dextran) und des Proteinmilieus auf die Trennung von freiem und an Antikörper gebundenem125I-Insulin auf die radioaktive Insulinbestimmung mit der Kohle-Dextran-Methode untersucht. Das Verhalten beider Fraktionen in Anwesenheit von verschiedenen Konzentrationen von Albumin, Dextran, normalem Meerschweinchenserum und normalem Humanserum wurde studiert und die Bedingungen für eine maximale Adsorption von freiem Insulin an Kohle bei minimaler Adsorption von gebundenem Insulin aufgestellt. Die erhaltenen Ergebnisse wurden mit denen der doppelten Antikörpermethode verglichen. — Unter diesen Arbeitsbedingungen ist es möglich, Insulin in einem unbekannten Serum einer Verdünnung von 1/20 oder 1/10 mit einer Empfindlichkeit von 0,5 μU zu bestimmen.
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References
Herbert, V., Lau, K.S., Gottlieb, C.W., Bleicher, S.J.: Coated charcoal immunoassay of insulin. J. clin. Endocr.25, 1375–1384 (1965).
Keane, P.M., Pearson, J., Walker, W.H.C.: Dextrancoated charcoal immunoassay of insulin. Diabetologia4, 339–344 (1968).
Cresto, J.C., Albani, H., Degrossi, O., Mitta, A.E.A.: Preparaciön de hormona de crecimiento humano125I y131I de alta actividad específlca en la C.N.E.A. Su aplicaciôn ‘in vitro’ e ‘in vivo’. Unpublished.
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Supported by grants from Farbwerke Hoechst AG and the International Atomic Energy Agency (Contract 814/RB).
Fellow of the Argentine National Research Council.
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Cresto, J.C., Dujovne, I.L., Castellani, P.I. et al. Insulin radioimmunoassay by the charcoal-dextran technique. Diabetologia 8, 292–295 (1972). https://doi.org/10.1007/BF01225574
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