Die Nucleinsäuren grüner und gebleichter Zellen von Euglena gracilis

Zusammenfassung

Bei der Isolierung der Gesamtnucleinsäuren aus autotroph gewachsenen Zellen von Euglena gracilis und ihrer säulenchromatographischen Auftrennung an methyliertem Serumalbumin nach den Verfahren, welche für Blau- und Grünalgen optimale Ergebnisse erbrachten, konnten nur drei Komponenten der löslichen RNA und zwei der hochmolekularen RNA nachgewiesen werden. Zellaufschluß in Gegenwart von Na-Dodecylsulfat (SDS) führte auch zur Extraktion der nativen DNA, welche im Eluierungsdiagramm als zusätzliches Absorptionsmaximum erschien. Mixotroph gewachsene Zellen besaßen die gleiche Zusammensetzung an Nucleinsäuren wie autotrophe. Mittels Dichtegradienten-Zentrifugation ließen sich die Masse der DNA in einem Sediment, die der Plastiden in einer grünen Bande anreichern. Letztere enthielten je eine Komponente DNA und hochmolekulare RNA; die Komponenten der löslichen RNA, sowie die Hauptmenge der hochmolekularen RNA blieben dabei in dem Überstand, welcher bei der ersten niedertourigen Zentrifugation des Ausgangshomogents angefallen war.

In permanent gebleichten Zellen (durch Streptomycin, erhöhte Temperatur) ließen sich analog die Komponenten der löslichen RNA und die DNA nachweisen, jedoch fehlte bei der hochmolekularen RNA die typische Aufteilung in die zwei Komponenten (IV und V). Die Basenzusammensetzung derselben war identisch, unabhängig von autotropher oder mixotropher Anzucht der Zellen. Auch zwischen den beiden Teilfraktionen der hochmolekularen RNA aus gebleichten Zellen bestand kein Unterschied hinsichtlich des Basenverhältnisses; ein Vergleich mit den grünen Zellen zeigte jedoch, daß der Gehalt an Cytosin höher, der an Adenin niedriger lag.

Summary

The extraction of total nucleic acids from autotrophically grown cells of Euglena gracilis and their chromatographic separation on methylated serum albumin recently successfully applied to blue-green and green algae cells yielded 3 fractions of soluble RNA and two of high molecular RNA only. Cell disruption in the presence of SDS, however, made the native DNA extractable which appeared consequently as an additional peak in the chromatographic pattern. Cells from mixotrophic cultures had an analogous set of nucleic acids compared with those from autotrophic ones. Density gradient centrifugation gave rise to a sediment containing the bulk DNA, and to a band in which the plastids had accumulated. From ther latter a fraction of DNA and high molecular RNA was isolated; the soluble RNA and the bulk high molecular RNA was associated with a supernatant resulting from an initial low speed centrifugation of the original homogenate.

Cells permanently bleached (by Streptomycin, increased temperature) had the typical set of soluble RNAs and DNA; the high molecular RNA, however, was eluted in a more or less uniform peak. The base composition of the fractions IV and V of high molecular RNA was identical, independent of autotrophic or mixtrophic growth of the cells. The two partial fractions of the high molecular RNA of bleached cells were identical, too, as far as the base ratio is concerned; compared with the green cells, however, the content of cytosine tended to increase, that of adenine to decrease.