All-trans-Retinal (atR) hemmt die Expression der Metalloproteinase Stromelysin in retinalem Pigmentepithel (RPE)

Zusammenfassung

Fragestellung. Die pathobiologischen Vorgänge bei der proliferativen Vitreoretinopathie (PVR) sind komplex. Der Mechanismus der Freisetzung retinaler Zellen aus ihrem Zellverbund ist bisher nicht geklärt. Die Metalloproteinase Stromelysin baut Proteine der extrazellulären Matrix (ECM) ab. Auf diesem Weg könnten retinale Zellen in den Glaskörperraum freigesetzt werden. Die Expression des Stromelysingens in humanen RPE-Zellen wurde bereits nachgewiesen. Hier wurde die Stromelysingenexpression unter all-trans-Retinal (atR) untersucht.

Material und Methode. Es wurden humane RPE-Zellen der Passagen 2–5 verwendet. Die Expression des menschlichen Stromelysingens wurde mittels Reverser-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion anhand spezifischer Oligonukleotide untersucht. Dabei wurden die RPE-Zellen mit 162 nmol/l Tetraphorbolester (TPA) alleine bzw. gleichzeitig mit 1 μmol/l atR behandelt.

Ergebnisse. TPA steigerte die Stromelysinexpression im RPE. Inkubation mit TPA und atR setzte diese Steigerung herab. Die verminderte Expression ließ sich semiquantitativ bestimmen.

Schlussfolgerung. Die Stromelysinexpres-sion im RPE ist unter 1 μmol/l atR herabgesetzt. Die Dedifferenzierung der RPE-Zellen könnte zu niedrigen intrazellulären atR-Konzentrationen führen. Damit könnte die Hemmung der Stromelysingenexpression verloren gehen und eine Steigerung der Expression resultieren. Dies kann die Freisetzung retinaler Zellen aus ihrem Zellverbund erklären und damit einer der initialen Schritte bei der Entwicklung der PVR sein.

Abstract

Background. The pathobiology in proliferative vitreoretinopathy (PVR) is complex. The mechanism of the release of retinal cells from their cellular bond is unknown. The metalloproteinase stromelysin cleaves proteins of the extracellular matrix (ECM). This may liberate retinal cells. The expression of stromelysin in human RPE cells has been demonstrated. Here, stromelysin gene expression under all-trans-Retinal (atR) was investigated.

Materials and Methods. Human RPE-cells were used from passage 2 to 5. The expression of the human stromelysin gene was determined by reverse transcriptase-polymerase chain reaction using specific oligonucleotides. RPE-cells were incubated with 162 nmol/l tetraphorbolester (TPA) alone or simultaneous with 1 μmol/l atR.

Results. TPA increased the expression of stromelysin in RPE cells. Incubation with TPA and atR lowered this increase. The decrease of expression was calculated semiquantitatively.

Conclusions. The expression of stromelysin in RPE cells is lowered after incubation with 1 μmol/l atR. The dedifferentiation of RPE-cells may decrease intracellular atR levels. This could turn an inhibition of stromelysin gene expression to an increase. This may then release retinal cells from their cellular bond and therefore be one of the initial steps in the development of PVR.