Summary
In a case of panencephalitis the immunofluorescence technique was used to prove the presence of γ-globuline in plasmacells of perivascular infiltrations. The following four different brain tissue preparation methods were employed and the results compared: 1. formalin fixation, 2. modification of the Albrecht Carnoy-chloroform fixation, 3. lyophilisation with polyaethylenglycoll embedding, 4. frozen sections of unfixed tissue.
The brightest staining and the utmost preservation of the tissue structure was obtained with the modified Carnoy-chloroform- and the lyophilisation techniques. The fluorescence in the frozen sections was sufficient, but the immunological reaction could often not be localized due to the loss of the tissue structure. The formalin treated tissue did not show any fluorescence. We consider the lyophilisation method with polyaethylenglycoll embedding for brain tissue as the best method since no chemical fixing agent is employed and therefore no unspecific staining resulting from denaturated protein structures is to be expected.
Zusammenfassung
An perivasculären entzündlichen Infiltratzellen einer Panencephalitis wurde die Immunofluorescenz als Nachweis vom γ-Globulin in Plasmazellen untersucht und die fluorescenzoptischen Ergebnisse folgender vier verschiedener Gewebepräparationsmethoden verglichen: Formolfixierung, Modifikation der Albrechtschen Carnoy-Chloroformfixierung, Gefriertrocknung mit Carbowax-Einbettung und Gefrierschnitt-Technik an unfixierten Geweben. Die beste Immunofluorescenz bei gleichzeitiger guter Wahrung der strukturellen Gewebeformation wurde erzielt mit der modifizierten Carnoy-Chloroformfixierung und der Gefriertrocknung, während die Gefrierschnitt-Technik am unfixierten Gewebe zwar eine ausreichende Fluorescenz zeigte, aber in der Lokalisation des immunologischen Geschehens unzureichend war. Das formalinfixierte Gewebe war fluorescenzoptisch inaktiv. Als Methode der Wahl für die Fluorescenzmikroskopie an Hirngewebe wird die Gefriertrocknung mit Carbowax-Einbettung angesehen, da chemische Fixierungmittel nicht benutzt werden und daher denaturierte Eiweißstrukturen fluorescenzoptisch nicht zu erwarten sind.
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Mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft und durch die Stiftung Volkswagenwerk.
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ter Meulen, V., Müller, D. Immunohistologische, feingewebliche und neurochemische Untersuchungen bei Encephalitiden. Acta Neuropathol 10, 74–81 (1968). https://doi.org/10.1007/BF00690511
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