Electron microscopic observations in mice infected with Japanese encephalitis

Summary

Cerebral and cerebellar cortices, choroid plexus and spinal cord of mice, inoculated intracerebrally with a brain emulsion containing Japanese encephalitis virus (JEV), were studied electronmicroscopically to determine the cell type and the site of JEV replication.

72 hours after inoculation, when the mice began to show encephalitic symptoms, 70 to 80% of all cortical neurons and anterior horn cells contained many spherical particles mostly located in the smooth endoplasmic reticulum and a few in the granular endoplasmic reticulum. The individual particles demonstrated an uniform substructure consisting of an electron dense central core of 25–30 mμ diameter, an outer less electron dense zone and an outermost limiting membrane of 40 mμ diameter. 96 hours after inoculation, the cytoplasm of cortical neurons and anterior horn cells was observed to contain very many vacuoles and vesicles. Particles were found widely scattered throughout the vacuoles and vesicles, and were observed for the first time in the endoplasmic reticulum of the stellate neurons and in Purkinje cells, though fewer. No such particles were observed in control and normal mouse groups. So-called eosinophic intranuclear inclusions of epithelial cells of choroid plexus failed to show any particles in their nuclei or cytoplasmic vesicles. Considering that no particulate matter, identifiable as JEV, was identified within any of the glial cells or endothelium in this examination, it was concluded that JEV was really neurotropic and replicates in the endoplasmic reticulum of the neurons.

Zusammenfassung

Groß- und Kleinhirnrinde, Plexus chorioideus und Rückenmark von Mäusen wurden nach intracerebraler Inoculation einer Hirnemulsion mit Virus der Encephalitis japonica (JEV) elektronenoptisch untersucht, um den Ort der JEV-Replikation zu bostimmen.

72 Std nach der Inoculation bei Beginn der encephalitischen Symptome enthielten 70 bis 80% aller Rindenneurone und Vorderhornzellen viele sphärische Partikel, die meist im zarten endoplasmatischen Reticulum (EPR) und vereinzelt im granulären EPR lokalisiert waren. Die Einzelpartikel zeigten eine gleichförmige Substruktur aus einem elektronendichten zentralen Hof von 25–30 mμ Durchmesser, einer äußeren, weniger elektronendichten Zone und einer äußersten Grenzmembran von 40 mμ Durchmesser. 96 Std nach der Inoculation zeigte das Cytoplasma der Rinden- und Vorderhornneurone sehr viele Vacuolen und Vesiceln. Partikel wurden weit verstreut in den Vacuolen und Vesiceln sowie erstmals im ERP der Sternzellen und Purkinjezellen angetroffen, allerdings in geringerer Zahl. Keine derartigen Partikel wurden in Kontrolltieren und normalen Mäusegruppen angetroffen. Sogenannte eosinophile intranucleäre Einschlüsse in Epithelzellen des Plexus chorioideus zeigten keine derartigen Partikel im Kern oder in den cytoplasmatischen Bläschen. Nachdem keine als JEV identifizierbaren Partikel in Glia- und Endothelzellen nachzuweisen waren, wird angenommen, daß das JEV echt neurotrop ist und sich im EPR der Nervenzellen repliziert.