ISSN:
1432-0878
Keywords:
Leukocyte
;
Peripheral
;
Human
;
Ultrastructure
;
Osmium-Zinc-Impregnation
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Biology
,
Medicine
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Leukozytenkonzentrate des peripheren Blutes von gesunden Versuchs-personen wurden in 2,5%iger Glutaraldehyd-Lösung (0,1 M Na-Cacodylat-Puffer, pH 7,3) vorfixiert und nach der Methode von Maillet (1959) mit OsO4 + ZnJ2 inkubiert. Dickschnitte wurden mit dem Mikroanalysator (Siemens) auf ihren Gehalt an Osmium, Zink und Jod analysiert und die Dünnschnitte mit dem Elektronenmikroskop untersucht. Bei der Mikroanalyse ließen sich Osmium und Zink, nicht aber Jod nachweisen. Die elektronenmikroskopischen Untersuchungen ergaben folgende Resultate: Beträgt der pH-Wert der Inkubationslösung 5,6, so findet sich eine starke Os/Zn-Imprägnation des Golgi-Apparates, des Kernspaltes und des Endoplasmatischen Retikulums bei sämtlichen Arten der weißen Blutzellen. Die Matrix der Mitochondrien dieser Zellen ist im allgemeinen weniger stark imprägniert. Auch in den Lysosomen der Monozyten und Plasmazellen sind geringfügige Os/Zn-Präzipitate nachweisbar. Es findet keine Reaktion in den Leukozytengranula und in den Zentriolen statt. Dagegen zeigen die Lipidtropfen der eosinophilen Granulozyten eine sehr starke, homogene Os/Zn-Imprägnation. Diese ist bereits nach 40 min Inkubation voll ausgeprägt. Bei einer Schnittkontrastierung mit Uranylacetat werden die Os/Zn-Präzipitate wieder herausgelöst, wenn die Kontrastierung länger als 2 min dauert. Eine Bleikontrastierung hat keinen Einfluß auf die Os/Zn-Präzipitate. Bei Erhöhung des pH-Wertes der Inkubationslösung auf 6,2 kommt es zur starken Imprägnation des Externums der eosinophilen Granula, während Kernspalt, Golgi-Apparat und Mitochondrienmatrix keine Reaktion zeigen. Die Imprägnationsdichte der Lipidtropfen der eosinophilen Granulozyten ist pH-unabhängig.
Notes:
Summary “Buffy coats” of normal human peripheral blood were fixed in 2.5% glutaraldehyde (buffered with 0.1 M Na-cacodylate, pH 7.3) and incubated with a mixture of osmium tetroxide and zinc iodide (pH 5.2) after the method of Maillet (1959). Utilizing an electron probe microanalyser (Siemens), the authors demonstrated the presence of osmium and zinc in the specimen, whereas the presence of iodide could not be proved with certainty. The ratio of osmium and zinc in the precipitates ranges from 3/2 to 4/1. Electron microscopic studies of the leukocytes have lead to the following results: the Golgi apparatus, the perinuclear cleft and the endoplasmic reticulum (ER) of all types of leukocytes are strongly impregnated with osmium/zinc, whereas the matrices of the mitochondria are less impregnated. Osmium/zinc precipitates have also been detected in the lysosomes of monocytes and plasma cells. No reaction was evident in the leukocytic granules or centrioles. The presence of lipid droplets in eosinophils has been demonstrated. These droplets show a dense homogeneous osmium/zinc impregnation which reaches its maximum after 40 minutes of incubation, compared with much longer incubation times (5–6 hours) for other cellular components. Setting the pH of the osmium tetroxide-zinc iodide solution to 6.2 resulted in a dense impregnation of the “externum” of the eosinophilic granules. At this same pH, the perinuclear cleft, Golgi apparatus and mitochondrial matrix did not show a definite reaction. The extent of impregnation of the lipid droplets of the eosinophils showed no dependency on pH. Care must be taken when a stain containing uranyl acetate is used since this substance dissolves the Os/Zn precipitates. Exposure of the precipitates to the uranyl acetate for longer than 2 minutes results in gradual dissolution within complete dissolution in 10 minutes.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF00337639
