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  • 1970-1974  (1)
  • 1972  (1)
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  • 1970-1974  (1)
Year
  • 1
    Electronic Resource
    Electronic Resource
    Springer
    Journal of cancer research and clinical oncology 78 (1972), S. 265-281 
    ISSN: 1432-1335
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Medicine
    Description / Table of Contents: Zusammenfassung Bemerkenswerte Portschritte in den Methoden zur Isolierung von Kernen und Kernkörperchen aus Tumorzellen haben zusammen mit der raschen Entwicklung von Techniken zur Reinigung und strukturellen Analyse hochmolekularer RNA neue Möglichkeiten zum Vergleich zwischen Tumorzellen und anderen Zellen geschaffen. Bei hochgereinigter nucleolarer 45S, 35S und 28S RNA sowie ribosomaler 28S und 18S RNA aus Novikoff-Hepatomzellen wurde nach In-vitro-Markierung mit 32P-Orthophosphat eine vollständige Hydrolyse mit pankreatischer RNase durchgeführt. 28S RNA in-vivo-markierter Rattenleber wurde denselben Bedingungen unterworfen. Die resultierenden Oligonucleotide sind purinhaltige Produkte mit einem Pyrimidinrest am 3-terminalen Ende; in der Summe werden die gesamten Oligonucleotide eines Hydrolysats als der Pyrimidin-Katalog des betreffenden ENA-Moleküls bezeichnet. Sie wurden zunächst entsprechend ihrer Kettenlänge bei pH 7,6 über DEAE-Sephadex A-25 getrennt und die Einzelkomponenten wurden entweder durch Papierelektrophorese bei pH 3,5 (Mono- und Dinucleotide) oder durch einen zweiten säulenchromatographischen Schritt über DEAE-Sephadex A-25 bei pH 3,3 isoliert. (Heptabis Tridecanucleotide). Mit Hilfe von Nucleotidanalyse, kompletter Verdauung mit T1-RNase und partieller Hydrolyse mit Milzphosphodiesterase wurden Sequenzanalysen durchgeführt. Die Primärsequenzen sowie die Häufigkeit solcher Oligonucletide wurden verglichen zwischen den verschiedenen hochmolekularen nucleolaren und ribosomalen RNA-Species des Novikoff-Hepatoms und der 28S RNA aus Ribosomen der Rattenleber. Interessanterweise unterschieden sich die polypurinen Sequenzbereiche der ribosomalen 18S RNA von denen der höhermolekularen Ribonucleinsäuren des Nucleolus, während zwischen ribosomaler und nucleolarer 28S RNA bezüglich der längeren Substrukturen keine Unterschiede nachweisbar waren. Auch bei der 28S RNA aus Leber-Ribosomen waren die isolierten längeren Polypurine identisch. Andererseits fanden sich signifikante Unterschiede beim Vergleich der Frequenzen pro Molekül für die Dinucleotide, wobei im Novikoff-Hepatom 134-G-Up-Reste, in der Rattenleber 103 solcher Partialsequenzen für die ribosomale 28S RNA bestimmt werden konnten. Diesen Kalkulationen ist eine Kettenlänge von 4500 Nucleotiden pro Molekül 28S RNA zugrundegelegt. Die jetzigen Ergebnisse ergänzen die bisher gefundenen Hinweise auf definierte Unterschiede in den Primärsequenzen hochmolekularer RNA-Species zwischen Tumor- und Normalzellen. Es wird versucht, unter Zuhilfenahme der bisherigen Kenntnisse diese evtl. spezifischen Sequenzbereiche näher zu lokalisieren. Mögliche therapeutische Konsequenzen und die kritischen wegweisenden Untersuchungen hierzu werden diskutiert.
    Notes: Summary The remarkable advances in the methods for the isolation of nuclei and nucleoli of cancer cells along with the rapid evolution of techniques for purification and structural analyses of high molecular weight RNA has provided new opportunities to comparatively evaluate the constituents of tumor cells and other cells. Complete pancreatic RNase digestion was carried out on highly purified nucleolar 45S, 35S and 28S RNA and ribosomal 28S and 18S RNA of Novikoff hepatoma ascites cells which were highly labeled in vitro with 32P-orthophosphate. In addition, rat liver ribosomal 28S RNA was labeled in vivo and subjected to the same isolation and RNase digestion procedure. The resultant oligonucleotides of the digests are purine containing products with a pyrimidine 3′ terminal, altogether referred to as the pyrimidine catalog of the RNA molecule. They were separated on DEAE Sephadex A-25 at pH 7.6 according to chain length and the single components were isolated by paper electrophoresis at pH 3.5 (mono- and dinucleotides) or by rechromatography on DEAE Sephadex A-25 at pH 3.3 (hepta- to tridecanucleotides). Sequence studies were carried out by means of nucleotide analysis, complete digestion with T1 RNase and partial digestion with spleen phosphodiesterase. The oligonucleotide sequences and their frequencies were compared between the different high molecular weight RNA species of the Novikoff hepatoma and 28S ribosomal RNA of rat liver. Interestingly, marked differences were found between the substructures of nucleolar 45S, 35S and 28S RNA compared to those of ribosomal 18S RNA. The longest polypurine sequences of 28S ribosomal RNA were identical to those of 28S nucleolar RNA and no differences were found between polypurines of the Novikoff hepatoma and rat liver. However, when the frequencies were determined for the mono- and dinucleotides, significant differences appeared mainly for the dinucleotide G-Up. On the basis of a calculated chain length of 4.500 for ribosomal 28S RNA, 134 G-Up residues were calculated for the Novikoff hepatoma compared to 103 for 28S rRNA of rat liver. These results provide further evidence for defined sequence differences between high molecular weight RNA of tumor cells and other cells and possibly point the way to definitive cancer chemotherapy. Critical evaluations of potential strategies are discussed.
    Type of Medium: Electronic Resource
    Library Location Call Number Volume/Issue/Year Availability
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