ISSN:
0340-1855
Keywords:
Schlüsselwörter Anti-dsDNA-Antikörper
;
rekombinantes humanes Antigen
;
Lupus erythematodes
;
ELISA-Assay
;
Crithidia-luciliae Immunfluoreszenztest
;
Key words Anti-dsDNA-antibodies
;
recombinant human antigen
;
systemic lupus erythematosus
;
ELISA-Assay
;
Crithidia luciliae immunofluorescence test
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Medicine
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Der Nachweis von anti-Doppelstrang-DNS-Antikörpern (dsDNA-Ak), ein Kriterium des American College of Rheumatology (ACR) zur Diagnostik des Systemischen Lupus erythematodes (SLE), stellt insbesondere bei aktiven Verlaufsformen, bei klinischer Einordnung und Beachtung der ACR-Kriterien ein hervorragendes Instrument in der Hand des Klinikers dar. Kommerzielle ELISA-Testsysteme sind sehr vorteilhaft bei der routinemäßigen Bestimmung einer großen Anzahl von Seren, weisen jedoch häufig nicht-SLE-spezifische Antikörper nach und geben daher falsch positive Ergebnisse. Ein neuentwickelter ELISA, welcher eine für ein humanes Protein codierende, humane rekombinante dsDNA (h-Rek) als Antigen verwendet, wurde mit zwei kommerziellen Testsystemen mit Genom-dsDNA aus Lachsspermien (Lachs-dsDNA, L-dsDNA) bzw. Plasmid-dsDNA (P-dsDNA) sowie einem Crithidia luciliae Immunfluoreszenztest (CLIF) hinsichtlich der diagnostischen Effizienz verglichen. Das untersuchte Kollektiv umfaßte 143 Probanden: 48 SLE-Patienten, 40 Rheumatoide Arthritis-Patienten und 25 undefiniert Erkrankte, deren Seren ANA-negativ, jedoch Lachs-dsDNA-Ak-positiv waren, sowie 30 gesunde Probanden. Alle Patienten rekrutierten sich aus der Rheumatologischen Ambulanz unseres Klinikums. Für das Gesamtkollektiv errechnete sich bei einer SLE-Prävalenz von 0,32 eine Sensitivität von 0,73 (h-Rek), 0,83 (L-dsDNA), 0,81 (P-dsDNA) bzw. 0,57 (CLIF), eine Spezifität von 0,84 (h-Rek), 0,62 (L-dsDNA), 0,63 (P-dsDNA) bzw. 0,98 (CLIF) und somit eine diagnostische Effizienz von 0,81 (h-Rek), 0,69 (L-dsDNA), 0,69 (P-dsDNA) bzw. 0,84 (CLIF). Verglichen mit den kommerziellen Testverfahren beweist sich der ELISA der neuen Generation mit humanem rekombinanten Antigen als erheblich spezifischer mit summatorisch deutlich besserer diagnostischer Effizienz als die herkömmlichen ELISA-Systeme und ist zudem viel sensitiver als der CLIF bei vergleichbarer diagnostischer Effizienz. Diese Ergebnisse erklären sich durch Verwendung des humanen rekombinanten Antigens anstatt undefinierter tierischer Genom- bzw. rekombinanter Plasmid-DNA zur Antikörperbindung.
Notes:
Summary Antibodies to double-stranded DNA (anti-dsDNA, dsDNA-Ab) are frequently found in systemic lupus erythematosus (SLE), especially during active disease and differ with respect to immunoglobulin class and avidity. The detection of anti-dsDNA is one of the diagnostic criteria for SLE according to the American College of Rheumatology (ACR). Most of the commercial ELISA test systems have great advantages in routine laboratory testing but often detect dsDNA-Ab which are not specific for SLE and therefore give false positive results for non-SLE patients. The newly developed ELISA presented here, using human recombinant dsDNA (h-Rek) is compared to two commercial ELISA tests with genomic dsDNA from salmon testes (L-dsDNA) or plasmid dsDNA (P-dsDNA) and to the Chrithidia luciliae immunofluorescence test (CLIF) as well. In this study 143 sera were tested, 48 derived from patients with SLE, 40 from rheumatoid arthritis patients, 26 from non-rheumatoid patients whose sera were ANA-negative but L-dsDNA-Ab-positive and 30 from healthy volunteers. All patients were followed and clinically defined by the rheumatology outpatient clinic of our hospital. The prevalence for SLE of all sera was 32%. The sensitivity was 0.73 (h-Rek), 0.83 (L-dsDNA), 0.81 (P-dsDNA) and 0.57 (CLIF); specificity was determined 0.84 (h-Rek), 0.62 (L-dsDNA), 0.63 (P-dsDNA) and 0.98 (CLIF). The diagnostic efficiency of the L-dsDNA- and P-dsDNA-assay was identical, 0.69, and amounted to 0.81 for the h-Rek and 0.84 for the CLIF. Comparing all the ELISA tests and CLIF, the human recombinant dsDNA ELISA is much more sensitive than the CLIF, but considerably more specific than the ELISA assays using genomic or plasmid DNA, whereas the diagnostic efficiency is very close to that of the CLIF. This new generation of anti-dsDNA ELISA using human recombinant dsDNA seems to be a much better diagnostic tool for the detection of highly specific anti-dsDNA antibodies in the diagnosis of SLE than other commercial ELISAs. These results can only be explained by the use of a human recombinant antigen instead of undefined genomic or recombinant plasmid DNA for immobilization.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/s003930050020
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