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  • 1
    ISSN: 1432-5233
    Keywords: Adipose tissue ; Diuretic agents ; Fat cells ; Fat homogenates ; Glucose metabolism
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Medicine
    Description / Table of Contents: Résumé Les Auteurs ont effectué des recherches expérimentalesin vitro avec des suspensions cellulaires et des extraits enzymatiques acellulaires de tissu adipeux épididymal, aussi bien quein vivo. dans le but d'étudier les possibles effets du furosémide, de l'acétazolamide et de l'acide éthacrynique sur le métabolisme du glucose stimulé par l'insuline dans le tissu adipeux de rat. Pour démontrer l'influence de la concentration des diurétiques, dans un milieu aprotéique, sur l'oxydation du glucose-1-14C et sur la fixation du14CO2 dans des suspensions acellulaires, on a utilisé des courbes typiques d'inhibition. Indépendemment de l'addition d'insuline, les constantes d'inhibition obtenues pour l'oxydation du glucose et pour la fixation du CO2 correspondaient à 2 ⋅ 10−4 M pour l'acétazolamide et à 5 ⋅ 10−5 M pour l'acide éthacrynique. En ce qui concerne le furosémide, l'inhibition maxima obtenue était égale à 30 %, à la concentration 6 ⋅ 10−4 M. Dans tous les cas, l'addition d'albumine au milieu empêchait complètement l'inhibition, vraisemblablement à cause du lien avec les protéines. Dans les expériences avec les extraits enzymatiques acellulaires, aucun des diurétiques employés influençait l'oxydation du glucose et la fixation du CO2. Chez les animaux qui n'avaient pas été pré-traités, les trois diurétiques, administrés à la dose d'une fois ou de trois fois 100 mg/kg n'exerçaient aucun effet sur l'incorporation du14C-glucose dans les lipides du tissu adipeux. Après injection i.p. d'insuline, l'incorporation du14C dans les lipides augmentait. L'administration simultanée d'une dose unique de 100 mg/kg d'acétazolamide et d'acide éthacrynique donnait lieu à une légère diminution de l'incorporation, à 80 % et 70 % respectivement. Aucun effet semblable a été observé avec le furosémide. Les résultats démontrent que la réduction de l'utilisation du glucose observée dans les adipocytes isolés n'a probablement aucune importantein vivo.
    Abstract: Resumen Se han llevado a cabo experimentosin vitro de comparación con suspensiones celulares y con extractos enzimáticos acelulares de tejido adiposo epididimario, y tambiénin vivo, para estudiar los posibles efectos de la furosemida, de la acetazolamida y del ácido etacrinico en el metabolismo de la glucosa, estimulado por la insulina, en el tejido adiposo de ratón. Para demostrar la influencia de la concentración de los diuréticos, en un medio proteico, en la oxidación de la glucosa-1-14C y en la fijación del14CO2 en suspensiones celulares, se han utilizado curvas tipicas de inhibición. Independientemente de que se aumente la insulina, las constantes de inhibición para la oxidación de la glucosa y la fijación del CO2, han resultado ser de 2 ⋅ 10−4 M para la acetazolamida y de 5 ⋅ 10−5 M para el ácido etacrínico. Empleando la furosemida, la máxima inhibición alcanzada ha sido del 30 %, con concentración de 6 ⋅ 10−4 M. En todo caso, la introducción de albúmina en el medio impedía totalmente la inhibición, verosímilmente a causa del vínculo con las proteinas. Durante la incubación con extractos enzimáticos acelulares, ninguno de los diuréticos influía en la oxidación de glucosa y en la fijación del CO2. En los animales no pretratados, el suministro de los tres diureticos en dósis de 100 mg/kg una sola vez u ocho, no producía efecto alguno en la incorporación de lo14C-glucosa en los lípidos del tejido adiposo. Tras inyección i.p. de insulina la incorporación de los14C en los lípidos aumentaba. El suministro simultáneo de una dósis única de 100 mg/kg de acetazolamida y de ácido etacrínico provocaba una leve reducción de la incorporación: respectivamente al 80 % y al 70 %. Con la furosemida no se apreció ningún efecto semejante. Los resultados demuestran que el reducido empleo de glucosa observado en las células adiposas aisladas, probablemente carece de importanciain vivo.
    Notes: Riassunto Esperimenti comparativi sono stati condottiin vitro con sospensioni cellulari e con estratti enzimatici acellulari di tessuto adiposo epididimale, nonchéin vivo, per studiare gli eventuali effetti del furosemide, dell'acetazolamide e dell'acido etacrinico sul metabolismo del glucosio, stimolato dall'insulina, nel tessuto adiposo di ratto. Per dimostrare l'influenza della concentrazione dei diuretici, in un mezzo aproteico, sull'ossidazione del glucosio-1-14C e sulla fissazione del14CO2 in sospensioni cellulari, sono state utilizzate tipiche curve di inibizione. Indipendentemente dall'aggiunta di insulina, le costanti di inibizione per l'ossidazione del glucosio e la fissazione del CO2 sono risultate essere di 2 ⋅ 10−4 M per l'acetazolamide e di 5 ⋅ 10−5 M per l'acido etacrinico. Impiegando il furosemide, la massima inibizione ottenuta è stata del 30 %, alla concentrazione di 6 ⋅ 10−4 M. In ogni caso, l'aggiunta di albumina al mezzo impediva completamente l'inibizione, verosimilmente a causa del legame con le proteine. Durante l'incubazione con estratti enzimatici acellulari, nessuno dei diuretici influenzava l'ossidazione del glucosio e la fissazione del CO2. Negli animali non pretrattati, i tre diuretici, somministrati alle dosi di 100 mg/kg per una sola volta o per otto volte, non avevano alcun effetto sull'incorporazione del14C-glucosio nei lipidi del tessuto adiposo. Dopo iniezione i.p. di insulina, l'incorporazione di14C nei lipidi aumentava. La contemporanea somministrazione di un'unica dose di 100 mg/kg di acetazolamide e di acido etacrinico provocava una lieve riduzione dell'incorporazione, rispettivamente all'80 e al 70 %. Nessun effetto del genere è stato osservato con il furosemide. I risultati dimostrano che la riduzione dell'utilizzazione del glucosio osservata nelle cellule adipose isolate non ha probabilmente alcuna importanzain vivo.
    Type of Medium: Electronic Resource
    Library Location Call Number Volume/Issue/Year Availability
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  • 2
    ISSN: 1573-904X
    Source: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Topics: Chemistry and Pharmacology
    Notes: Abstract An antiserum was prepared for the determination of glibenclamide and for the estimation of other commercially available sulfonylureas. Rabbits were immunized with a glibenclamide-BSA conjugate. Tritiated glibenclamide was used as the tracer. The assay was performed in the presence of 8-anilinonaphthalenesulfonic acid to displace glibenclamide bound to serum protein, and free and antibody bound tracer were separated by dextran-coated charcoal. For glibenclamide determination in serum and plasma the limit of detection was 3 ng/ml. Sensitivity calculated for the whole determination range was 102 cpm for a 10 % concentration difference. Specificity studies showed a cross-reaction of less than 0.1 % for glibenclamide metabolite M1 and 9 % for metabolite M2. Other sulfonylurea drugs display cross-reactivities from 0.1% (chlorpropamide) to 190% (gliquidone). Both intra-assay and inter-assay imprecision were below 10 %. Accuracy was established by comparison of the present method with HPLC. The assay was applied to the specific determination of glibenclamide in clinical trials and for diagnosing factitious hypoglycemia caused by sulfonylureas.
    Type of Medium: Electronic Resource
    Library Location Call Number Volume/Issue/Year Availability
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