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    Chemical fractionation of immunosuppressive gamma-immunoglobulins from anti mouse-thymocyte serum (ATS) (1972)
    Springer
    Research in experimental medicine 157 (1972), S. 1-11 
    Details
    ISSN: 1433-8580
    Schlagwort(e): Anti-mouse-ATS ; ATG-fractions ; Chromatography ; Immunosuppression ; Anti-Maus-ATS ; ATG-Fraktionierung ; Chromatographie ; Immunosuppression
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Medizin
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung Aus Antithymocytenserum (ATS) gegen Mausthymocyten wurden 6 IgG-Fraktionen mit verschiedener spezifischer immunosuppressiver Aktivität durch wiederholte Ionenaustauscherchromatographie an DEAE-Sephadex gewonnen. Dabei wurden extrem flache Salzgradienten bei konstantem pH verwendet. Als Kriterium zur Bildung einheitlicher Fraktionen des Säuleneluates dienten, an Stelle des üblicherweise bestimmten Proteingehaltes, Ladungsunterschiede der in der Polyacrylamidelektrophorese dargestellten Gamma-G-Banden. Aus einer so gewonnenen reinen IgG-Fraktion gelang die Auftrennung von 4 verschiedenen Unterfraktionen mit einer bis auf das 30fache gesteigerten spezifischen immunosuppressiven Aktivität. Gleichzeitig wurde jegliche lymphocytotoxische Wirkung aus diesen IgG-Fraktionen eliminiert. Damit scheint eine Möglichkeit gegeben, aus ATG die gewünschte immunosuppressive Aktivität erheblich anzureichern und gleichzeitig die cytotoxische Komponente abzutrennen.
    Notizen: Summary IgG fractions with differing immunosuppressive activity were separated by repeated ion exchange chromatography on DEAE-Sephadex, using narrow salt gradients at constant pH. Charge differences, estimated by systematic disc electrophoresis of the column effluent, served as a parameter for pooling the fractions and characterizing the corresponding IgG species. 6 main fractions, each containing pure IgG in part and subsequently 4 highly purified subfractions were obtained. Differences of immunosuppressive activity were found in these fractions and a substantial enrichment of the specific immunosuppressive activity was achieved. Lymphocytotoxicity of the fractions having higher specific immunosuppressive activity was abolished, suggesting different factors to be responsible for these properties. Further, this suggested the possibility of eliminating undesirable side effects due to cytotoxic activity. Although the final yields were incommensurate with the 5% of the total IgG-population estimated to represent immunosuppressiverelevant antibodies, this approach may provide a promising technique for further purification.
    Materialart: Digitale Medien
    URL: http://dx.doi.org/10.1007/BF01851392
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    Isolation and physical-chemical characterization of a humoral, sleep inducing substance in rabbits (factor ‘delta’) (1972)
    Springer
    Cellular and molecular life sciences 28 (1972), S. 919-921 
    Details
    ISSN: 1420-9071
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin
    Notizen: Zusammenfassung Das Hämodialysat schlafender Kaninchen (unter Einfluss thalamischer Reizung) wurde unter Kontrolle der «Delta-Schlaf»-induzierenden Aktivität fraktioniert. Nach Entsalzung über Sephadex G-10 wurde die hypnogene Fraktion durch anschliessende präparative Dünnschichtchromatographie in 6 verschiedene ninhydrin-positive Fraktionen getrennt (MG〉Cl−). Eine davon enthielt die hypnogene Aktivität. Diese Fraktion 2 wurde über Sephadex G-15 in 3 ninhydrin-positive Gipfel aufgetrennt. Nur die Fraktion mit dem geringstenV e enthielt die hypnogene Aktivität. Durch Vergleich mit dem Elutionsvolumen von Markersubstanzen konnte für die aktive Substanz ein Molekulargewicht zwischen 355 und 1500 geschätzt werden. Präparative Hochspannungs-Papierelektrophorese trennte das aktive Material in vier Unterfraktionen. Nur eine elektrophoretisch und chromatographisch einheitliche Fraktion (2) enthielt die hypnogene Aktivität. Aus dieser Fraktion wurden nach saurer Hydrolyse mindestens 7 verschiedene Aminosäurereste freigesetzt. Dieses Resultat wurde durch Dansylierung vor und nach saurer Hydrolyse verifiziert; gleichzeitig wurden Artefakte durch kontaminierende Aminosäuren aus dem Papier ausgeschlossen. Die Ergebnisse lassen auf die Peptidnatur einer humoralen «Delta-Schlaf»-induzierenden Substanz schliessen (sleep factor ‘delta’).
    Materialart: Digitale Medien
    URL: http://dx.doi.org/10.1007/BF01924946
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    Zur Bestimmung der Lymphozytotoxizität (1973)
    Springer
    Cellular and molecular life sciences 29 (1973), S. 643-644 
    Details
    ISSN: 1420-9071
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Biologie , Medizin
    Notizen: Summary The technique for testing lymphocytotoxicity by staining with Trypan-blue has been reevaluated. It was found that both cell suspension and aqueous stock solution (0.5%) of Trypan-blue must be adjusted to a pH of 7.3 prior to mixing in order to avoid a toxic effect of the dye itself, accounting for the lysis up to 35% of the cell population. This modification permitted a reproducibility of the results with a variation of less than 5%. This Trypan-blue test gives identical results as are obtained with the51Cr releasing method. The results may also be important for testing the viability of cells with Trypan-blue.
    Materialart: Digitale Medien
    URL: http://dx.doi.org/10.1007/BF01926721
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    Immuntherapeutische Untersuchungen mit Verbrennungstoxin am Modell der Maus (1972)
    Springer
    Research in experimental medicine 158 (1972), S. 34-42 
    Details
    ISSN: 1433-8580
    Schlagwort(e): Burn Toxin ; Lethal Burns ; Active Immunization ; Serum Therapy ; Verbrennungstoxin ; Letale Verbrennungsgröße ; Aktive Immunisierung ; Serumtherapie
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Medizin
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung Es gelang am Verbrennungsmodell der Maus, die Identität eines aus in vitro verbrannter Haut isolierten spezifischen Verbrennungstoxins mit einem bei gleichartiger thermischer Schädigung in vivo gebildeten Toxin unter Beweis zu stellen und durch aktive und passive Immunisierung die Möglichkeit einer gezielten Immuntherapie von Verbrennungen aufzuzeigen.
    Notizen: Summary With an experimental burn model in mice, we were able to demonstrate the identity of a specific burn toxin isolated from skin burntin vitro and producedin vivo under identical thermal injuries. Active and passive immunization showed a significant protective effect, and therefore, specific immunotherapy in burns may be possible.
    Materialart: Digitale Medien
    URL: http://dx.doi.org/10.1007/BF01851684
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    Pathophysiologische Untersuchungen an einem Verbrennungsmodell der Maus (1972)
    Springer
    Research in experimental medicine 158 (1972), S. 23-33 
    Details
    ISSN: 1433-8580
    Schlagwort(e): Thermal Injuries ; Burn Toxin ; Burn Model ; Scalds ; Thermische Schädigungen ; Verbrennungstoxin ; Verbrennungsmodell ; Verbrühungen
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Medizin
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung 1. Es wurde ein neues Verbrennungsmodell der Maus entwickelt, das es erlaubt, Verbrennungen und Verbrühungen unter kontrollierten Bedingungen am lebenden Tier vorzunehmen. 2. Der Unterschied zwischen Verbrennung und Verbrühung in bezug auf die Mortalität, den Temperaturverlauf in der Haut und die histologischen Unterschiede konnte gezeigt werden. Der mechanismus für eine Toxinbildung bei der Verbrennung wurde bewiesen. 3. Der Einfluß des isolierten Toxins und der letalen Verbrennung auf die Nierenfunktion wurde an Veränderungen der Kreatinin- und Harnstoffwerte im Serum nachgewiesen. 4. Das Größenverhältnis der durch thermische Energie geschädigten Haut zum Körpergewicht und der Oberfläche zeigte sich als kritischer Parameter der Mortalität.
    Notizen: Summary 1. A new technique to apply high temperature burns and scalds under controlled conditions in living mice has been established. 2. The difference between scalds and high temperature heat injuries with respect to the histological changes, the temperature profile within the skin and the mortality rate has been demonstrated. A mechanism for toxin formation shown to occurin vitro in mammalian skin under standardized energy application was reproducedin vivo. 3. The toxic effect of the isolated product and the lethal burn injury(in vivo) upon kidney function measured by serum creatinine and urea has been shown. 4. The relationship between the surface area injured and the animal's body weight and total surface as a critical parameter with respect to the survival chance has been established.
    Materialart: Digitale Medien
    URL: http://dx.doi.org/10.1007/BF01851683
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    Humoral transmission of sleep (1972)
    Springer
    Pflügers Archiv 331 (1972), S. 257-265 
    Details
    ISSN: 1432-2013
    Schlagwort(e): Humoral Sleep Transmission ; Dialysate Fraction ; Factor delta
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Medizin
    Notizen: Summary Sleep dialysate obtained from rabbits kept asleep by stimulation of the thalamic sleep area was separated by gel filtration on Sephadex G-10 into two fractions (Pools I and II). The effects of each fraction on the electrical brain activity (EEG) and on the motor behavior were assessed by infusion into the meso-diencephalic ventricular system of rabbit recipients and compared to the hypnogenic activity of the fresh dialysate, and/or its solid residue after lyophilization. Infusion of Pool I induced a marked and highly significant increase of the slow delta activities, symptomatic of ordinary (delta) sleep and a corresponding sleep behavior with decreased motor activity, quantified with an actograph. The hypnogenic activity of Pool I was higher when referred to the total sleep dialysate before fractionation, even though only 5% of the original weight of the solid constituents of the total dialysate was recovered in Pool I. By contrast, infusion of Pool II did neither increase the amount of delta activities nor induce a sleep behavior. Delta curve and actogram were similar to those of control recipients. The hypnogenic highly significant effect of the desalted Pool I (∼30 μg/0.05 ml/25 min) suggests the existence of a specific “sleep factor delta” in this fraction.
    Materialart: Digitale Medien
    URL: http://dx.doi.org/10.1007/BF00589132
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  • 7
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    Humoral transmission of sleep (1972)
    Springer
    Pflügers Archiv 338 (1972), S. 1-17 
    Details
    ISSN: 1432-2013
    Schlagwort(e): Humoral Sleep Transmission ; Isolation of Factor Delta
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Medizin
    Notizen: Summary Our previons technique for producing sleep dialysate from rabbit donors kept asleep during extracorporal dialysis was improved, as well as the assessment of the dialysate's hypnogenic activity. This was achieved by intraventricular infusion of dialysate to recipients submitted to electroencephalographic analysis (slow delta activity of “orthodox” sleep) and to behavioral kinesigraphic tests. Fractionation of the “crude” sleep dialysate was undertaken and the fractions tested with the same bio-assays. Gel filtration on Sephadex G-10 desalted the material. The salf-free fraction (higher MW) contained the hypnogenic activity. A separation into 6 different Ninhydrin-positive fractions was achieved by TLC. The hypnogenic activity resided in one of them only. After chromatography on Sephadex G-15, this material emerged as 3 different Ninhydrin-positive peaks. The hypnogenic activity was found in one of them with aV e suggesting a MW between 355 and 1500. By high voltage paper electrophoresis, 4 different Ninhydrin-positive spots were obtained from this active peak. Two of them yielded, after acid hydrolysis, seven different amino acids detected by amino acid analysis. The peptide nature of both compounds apparently associated with hypnogenic activity was suggested. Further quantitative separation into four fractions by high voltage paper electrophoresis made it possible to attribute the hypnogenic activity to one of them only. Dansylation and chromatography/electrophoresis of this fraction before and after hydrolysis sustained the assumption that alow molecular weight peptide might be responsible for the humoral transmission of sleep.
    Materialart: Digitale Medien
    URL: http://dx.doi.org/10.1007/BF00586851
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  • 8
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    232. Die Isolierung eines Toxines aus in vitro-verbrannter Mäusehaut und seine Bedeutung für die Verbrennungskrankheit im Tiermodell (1971)
    Springer
    Langenbeck's archives of surgery 329 (1971), S. 888-888 
    Details
    ISSN: 1435-2451
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Medizin
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung Als Ursache der Spätmortalität nach schweren Verbrennungen steht ein durch die Hitze in der Haut gebildetes „Toxin” zur Diskussion. Es gelang unter sterilen Bedingungen, in vitro aus der Haut keimfreier Mäuse ein bei standardisierter Verbrennung entstehendes Lipoprotein zu isolieren, zu charakterisieren und den Entstehungsmechanismus weitgehend aufzuklären. An einem neuen Tiermodell, das die Verhältnisse der in vitro-Verbrennungen nach Ausdehnung und Tiefe zu imitieren gestattet, konnte eine direkte Beziehung zwischen diesem „Toxin” und der Letalität gezeigt werden. Durch aktive Immunisierung und Behandlung mit heterologem antitoxischem Serum wurden tödlich verbrannte Tiere weitgehend geschützt. Ein Anstieg der Serum-Kreatinin und-Harnstoffwerte war bei den aktiv und passiv immunisierten Tieren am 16. Tag nach der Verbrennung nicht nachweisbar. Vielleicht eröffnen sich dadurch Aussichten, in Zukunft das Schicksal schwerverbrannter Menschen zu bessern.
    Notizen: Summary It is suggested that a special “toxin” formed in the skin by heat constitutes one of the causes of late mortality after severe burns. We succeeded in isolating, under sterile “in vitro” conditions, a lipoprotein from the skin of sterile mice, which forms after standardized burns, and were able to identify it and clarify its origin. With the aid of a new animal model which permits one to imitate the conditions encountered with “in vitro” burns, regarding their extent and depth, we were able to demonstrate a direct relationship between the presence of this “toxin” and the mortality rate. Animals which had received potentially fatal burns could be protected to a large extent by immunization with the toxin and treatment with heterologous antitoxic serum. In the actively and passively immunized animals no increase in serum creatinine or blood urea levels was observed on the 16th day after burning. This may perhaps open up new ways of improving the prognosis in cases of severe burns in humans.
    Materialart: Digitale Medien
    URL: http://dx.doi.org/10.1007/BF01770664
    Bibliothek Standort Signatur Band/Heft/Jahr Verfügbarkeit
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  • 9
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    Isolierung und physikalisch-chemische Charakterisierung eines Verbrennungstoxines aus der Mäusehaut (1971)
    Springer
    Clinical and experimental medicine 156 (1971), S. 110-128 
    Details
    ISSN: 1591-9528
    Schlagwort(e): Burn Toxin ; Membraneous Lipoproteins ; Biochemistry of Skin ; Verbrennungstoxin ; Membran-Lipoproteine ; Hautbiochemie
    Quelle: Springer Online Journal Archives 1860-2000
    Thema: Medizin
    Beschreibung / Inhaltsverzeichnis: Zusammenfassung Isolierte Mäusehaut wird kontrollierter Einwirkung thermischer Energie unterworfen. Daraus wird ein im Tierversuch toxischer Protein-Lipid-Komplex isoliert. Ein analoges, nicht toxisches Kontrollpräparat wird mit demselben Isolierungsverfahren aus nativer Haut gewonnen. Nach Ultrazentrifugation im Dichtegradienten zeigt sich für beide Substanzen in der Gelelektrophorese eine Proteinbande. Bei gleicher elektrischer Ladungsdichte unterscheidet sich der toxische Lipid-Protein-Komplex von seinem nichttoxischen Analogen durch größere Dichte und ein um ein Mehrfaches höheres Molekulargewicht. Beide Produkte enthalten 40% Lipid und 60% Protein mit 1% Aminozucker. Beide Lipidanteile bestehen qualitativ und quantitativ identisch aus sechs verschiedenen Neutrallipiden, die Proteinanteile aus sechs verschiedenen Polypeptidketten. Das Molekulargewicht des nativen Komplexes liegt um 1×106, das des toxischen um 3–4×106. Die toxische Substanz wird als ein Trioder Tetramer eines in normaler Haut vorhandenen Membran-Lipid-Protein-Komplexes angesehen. Für die Toxicität ist die Toxin-Protein-Fraktion hauptverantwortlich. Der Lipidanteil trägt auf unspezifische Weise zur Toxicität bei. Bakterien als Ursprung dieser Komplexe oder als mitverantwortlich für die Toxicität konnten durch Verwendung keimfrei aufgezogener Tiere ausgeschlossen werden. Damit wurde erstmals am Tiermodell nachgewiesen, daß ein Verbrennungstoxin in thermisch geschädigter Haut auftreten kann.
    Notizen: Summary A lipid-protein complex which has a lethal effect on recipient animals was isolated from mouse skin exposed to controlled thermal energy. The physical and chemical properties of the toxic product were similar to those of the corresponding biologically inactive compound isolated from native skin by the same method. Equivalent results were obtained when germ free, specific pathogen free (SPF) or randomly contaminated animals were used. From these results, bacteria were judged not to be involved either in the toxin formation or toxic activity. The toxic lipid-protein complex and the corresponding derivative from native skin were shown to have an identical electrical charge and the same lipid (40%) and protein (60%) content. The lipid moieties of both derivatives were made up of six lipid classes and the protein fraction was composed of six different polypeptides. The qualitative substructural composition was also identical in both derivatives. The toxic lipid-protein complex differed from the non-toxic material only by its larger size and higher density. The biological activity was shown to reside in the protein moiety, while the lipids contribute to the toxic activity to a certain extent. These results suggest that the toxic compound might be a polymer produced by thermal energy from a naturally occurring precursor.
    Materialart: Digitale Medien
    URL: http://dx.doi.org/10.1007/BF02045717
    Bibliothek Standort Signatur Band/Heft/Jahr Verfügbarkeit
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