ISSN:
1432-1912
Schlagwort(e):
Bovine Serum
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Kininogen
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Peptides
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Enzymes
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Structure Evaluation
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Rinderserum
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Kininogen
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Peptide
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Enzyme
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Struktur-aufklärung
Quelle:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Thema:
Medizin
Beschreibung / Inhaltsverzeichnis:
Zusammenfassung 1. Rinderserum ergab beim Umsatz mit Pepsin niedermolekulare, kininliefernde Spaltstücke. Das durch Fällung, Verteilung, Gelfiltration und Jonenaustausch-Chromatographie vorgereinigte Hydrolysat ließ sich durch Papierchromatographie in 2 Fraktionen trennen, auf die sich die kininliefernde Gruppierung im Verhältnis 5∶1 verteilte. 2. Beide kininliefernde Fraktionen waren resistent gegen Carboxypeptidase B, was gegen eine C-terminale Position der Kininsequenz spricht. Sie waren aktivierbar durch Trypsin, Pankreaskallikrein und auch Carboxypeptidase A. Trypsin in höherer Konzentration entwickelte aus der Hauptfraktion (L) Bradykinin, während mit Pankreaskallikrein, Carboxypeptidase A und kleinen Trypsinmengen Met-Lys-Bradykinin entstand. Die „direkte“ Aktivität der Fraktionen am Meerschweinchenileum lag bei maximal 1–2% der „indirekten“. 3. Aus der chromatographisch langsameren Hauptfraktion (L) wurde hoch-spannungselektrophoretisch ein einheitliches Minimalsubstrat für Kininogenasen isoliert. In seiner Aminosäurenanalyse entsprach es dem aus gereinigtem Rinderserum-Kininogen isolierten Hauptpeptid PKFL; auch beim Edman-Abbau ergaben sich keine Unterschiede. 4. Die früher für gereinigtes Kininogen beschriebenen Sequenzen sind also auch für Gesamtserum repräsentativ. Hinweise auf andersartige Peptide, insbesondere auf solche mit der Kininsequenz in C-terminaler Position, ergaben sich nicht.
Notizen:
Summary 1. Peptic treatment of bovine serum produced kinin yielding substances of low molecular weight. The hydrolyzate was purified by precipitation, partition, gel filtration and ion exchange chromatography. Subsequent paper chromatography revealed two fractions with a 5∶1 distribution of the kinin-yielding property. 2. Both kinin-yielding fractions were resistant to carboxypeptidase B, a finding which argues against a C-terminal position of the kinin sequence. They could be activated by trypsin, pancreatic kallikrein, and carboxypeptidase A. Higher concentrations of trypsin released bradykinin from the main fraction (L), whereas pancreatic kallikrein, carboxypeptidase A and low amounts of trypsin produced met-lysbradykinin. The “direct” activity of the fractions as measured on the guinea pig ileum was no more than 1–2% of the “indirect” activity. 3. A homogeneous minimal substrate was isolated from the chromatographically slower fraction L by high voltage electrophoresis. With respect to amino acid analysis and Edman degradation, it could not be distinguished from the peptide PKFL isolated from purified bovine kininogen. 4. Therefore, the sequences described previously in purified kininogen are also representative for whole serum. Evidence for different peptides, especially with the kinin sequence in C-terminal position, was not found.
Materialart:
Digitale Medien
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF00997326
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