ISSN:
1433-8580
Keywords:
Erythrocytes
;
Angiotensinase
;
Enzyme-Kinetics
;
Erythrozyten
;
Angiotensinase
;
Enzymkinetik
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Medicine
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung In menschlichen Erythrozytenfraktionen (hämoglobinfreie Erythrozytenmembranen; membranfreies Hämolysat; durch DEAE-Cellulose von Hämoglobin befreite Enzym-Protein-Fraktion) wurde mit Hilfe eines NADH-abhängigen optischen Tests mit Asparaginyl1-Angiotensin II-amid als Substrat die Aminopeptidaseaktivität untersucht. 1. Durch fraktionierte Ammoniumsulfatfällung wurden sechs Unterfraktionen aus der Enzym-Protein-Fraktion gewonnen. Mit Hilfe von enzymkinetischen Untersuchungen bei drei verschiedenen pH-Werten (pH 5,0; 7,0; 8,0) mit und ohne Zusatz von zwei verschiedenen Effektoren (Na2EDTA und Ca++) gelang der Nachweis von sechs verschiedenen Enzymen. 2. Durch die Inhibitoren Diisopropylfluorphosphat und p-Chloromercuribenzoat wurde bei verschiedenen pH-Werten (pH 5,0; 6,5; 7,0; 8,0 bzw. 6,5; 7,0; 8,0) eine signifikante Inaktivierung der Aminopeptidaseaktivität des membranfreien Hämolysats beobachtet. 3. Das Temperaturoptimum für die Aminopeptidaseaktivität des Hämolysats lag bei 47°C. Bei 37°C trat nach einer Inkubation von 2 Stunden ein Aktivitätsverlust von 20% ein.
Notes:
Summary Aminopeptidase activity of three fractions of human erythrocytes (membranes free of hemoglobin; hemolysate free of membranes; enzyme protein fraction made free of hemoglobin by DEAE-cellulose) was measured by a NADH dependent optical test using asparaginyl1-angiotensin II-amide as substrate. 1. From the enzyme protein fraction 6 subfractions were obtained by (NH4)2SO4 precipitation. By measuring enzyme kinetics at three different pH-values (pH 5,0; 7,0; 8,0) with and without addition of the effectors Na2EDTA and Ca++ the existence of 6 different enzymes could be demonstrated. 2. The aminopeptidase activity of the hemolysate made free of membranes could be inhibited by diisopropylfluorphosphate and p-chloromercuribenzoate at three different pH-values (pH 5,0; 6,5; 7,0; 8,0 and 6,5; 7,0; 8,0 respectively). 3. A reduction of enzymatic activity of 20% was found after incubation at 37°C for two hours.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF01851898
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