ISSN:
1590-3478
Keywords:
Muscle cell culture
;
hybrid myotubes
;
heterokaryons
;
gene activation
;
fluorescent latex microspheres
;
Hoechst stain
;
glucose-6-phosphate dehydrogenase
;
myoblast transplantation
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Medicine
Description / Table of Contents:
Sommario Il modello degli ibridi costituisce un sistema valido e riproducibile per studiare gli aspetti biochimici e molecolari implicati nell'attivazione genica. Tale sistema di fusione è stato utilizzato da precedenti autori per dimostrare l'attivazione di specifici geni umani in ibridi formati dalla fusione di cellule umane con cellule non-umane. Lo scopo di questa ricerca è stato quello di applicare il modello sperimentale degli ibridi per valutare la correzione di un'attività citoplasmatica, quale la glucosio-6-fosfato deidrogenasi (G6PD), in vitro, in ibridi formati tra mioblasti G6PD-deficitari e normali. Sono stati impiegati diverse metodiche per identificare i miotubi ibridi (colorante nucleo-specifico, Hoechst e microsfere di lattice fluorescinate e rodaminate). I nostri risultati indicano che vi è un ripristino dell'attività G6PD in tutti i miotubi ibridi formati; abbiamo quindi tentato di comprendere i meccanismi specifici sottostanti alla ricomparsa di quest'attività enzimatica per poterli applicare alla comprensione dei più complessi meccanismi implicati nell'attivazione di geni muscolari.
Notes:
Abstract Heterokaryons represent a stable and reproducible model system for the study of biochemical and molecular aspects responsible for muscle gene activation. Previous experiments have used this fusion system to demonstrate human gene activation in hybrids formed between human and non-human cells. The aim of this research was to apply this experimental model to the correction of a cytoplasmic activity, namely glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD), in vitro, in hybrid myotubes formed between G6PD-negative and positive myoblasts. Different identification methods were used (Hoechst stain and Fluorescent Latex Microspheres, FLMs) to identify hybrid myotubes formed. We demonstrated the restoration of G6PD activity in all hybrid myotubes formed; we then tried to elucidate the mechanisms underlying the restoration of this specific activity and apply the results obtained to the understanding of more complex mechanisms involved in muscle gene activation.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF02339040
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