ISSN:
1612-1112
Source:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Topics:
Chemistry and Pharmacology
Description / Table of Contents:
Zusammenfassung Es wird über Erfahrungen mit einem neuen “flying spot”-Densitometer bei Verwendung von Dünnschicht-Fertigplaltten Cellulose F und Kieselgel F254 berichtet. Die Untersuchungen befassen sich mit einigen durch die Dünnschicht-Chromatographie sowie durch die nachfolgende Messung bedingten Einflüssen auf die Meßergebnisse. An Leerplatten wurden je nach Beschichtungsmaterial und Meßrichtung sich z. T. erheblich unterscheidende Basislinien erhalten. Bei den Platten wurde jeweils die durch die Basislinien mit relativ ruhigem Verlauf bestimmte Richtung als Laufrichtung der Substanz bevorzugt. Der Einfluß vom Laufmittel sowie von den Untergrund nicht oder nur schwach und gleichmäßig anfärbenden Sprühreagentien auf das Kurvenbild ist gering und zu vernachlässingen. Je nach Laufrichtung der Substanz in Bezug auf die Beschichtungsrichtung bzw. je nach Meßrichtung bei vorgegebener Laufrichtung werden beim Ausmessen des entstandenen Substanzflecks, bedingt durch dessen Unregelmäßigkeit, unterschiedliche Meßwerte erhalten, z. B. für 1 μg 5-Hydroxyindol-3-essigsäure (5-HIE) auf Cellulose F-Platten quer zur Laufrichtung 80 mm2 und in Laufrichtung 100 mm2. Die untere Nachweisgrenze beträgt für 5-HIE auf Cellulose F-bzw. Kieselgel F254-Platten 0,1 bzw. 0,2 μg, die Standardabweichung s=±0,05 μg 5-HIE. Außerdem ergibt sich eine Abhängigkeit der Meßwerte von der Blende und der Schwingungsweite der Platte im Densitometer. Eine vergleichende Auswertung ist daher nur bei gleicher Laufrichtung wie bei gleicher Schwingungsweite bzw. Blende möglich. Für jede Platte ist infolge ungenügender Reproduzierbarkeit der Meßwerte auf verschiedenen Platten eine Eichkurve erforderlich. Bei verschieden weitem Lauf von Flecken der gleichen Substanz auf derselben Platte ist zur Feststellung des Höchstwertes eines jeden Fleckes das Abfahren in parallen millimeterweise verschobenen Bahnen erforderlich.
Abstract:
Sommaire On rapporte des expériences faites avec un nouveau densitomètre «flying spot» sur des plaques préfabriquées à couches de Cellulose F et de Gel de silice F254. Les essais avaient pour but d'explorer certaines influences sur le résultat des mesures, exercées par la chromatographie sur couche mince et par la mesure ultérieure. Sur des plaques non traitées, les lignes de base présentent souvent des différences considérables, selon le matérial de la couche et la direction de mesure. Pour la direction de déplacement de la substance sur la plaque, on a donné la préférence à celle qui donné des lignes de base relativement stables. L'influence sur le profil de la courbe soit du solvant, soit des réactifs qui ne produisent pas ou que très peu de coloration de fond, est minime et peut être négligée. Suivant la direction de déplacement de la substance par rapport à la direction de formation de la couche, ou suivant la direction de mesure pour une direction de déplacement déterminée, des valeurs différentes ont été trouvées pour irrégularité; par exemple, pour 1 μg d'acide 5-Hydroxy-indole-3 acétique (5-HIE) sur des plaques de Cellulose F, la mesure de la tache de substance obtennue, à cause de son irrégularité; par exemple, pour 1 μg d'acide 5-Hydroxyindole-3 acétique (5-HIE) sur des plaques de Cellulose F, on a obtenu 80 mm2 perpendiculairement à la direction d'écoulement du solvant, et 100 mm2 parallèlement à la direction d'écoulement du solvant. Pour 5-HIE, la limite de détection sur Cellulose F est de 0,1 μg, et sur gel de silice F254 de 0,2 μg; la déviation standard s=0,05 μg 5-HIE. En outre, les valeurs mesurées dépendent de l'ouverture et de l'amplitude d'oscillation dans le densitomètre. Les résultats sont donc comparables seulement dans les cas où la direction d'écoulement du solvant, l'amplitude, et l'ouverture sont toutes identiques. Par suite de la reproductibilité insuffisante des valeurs mesurées sur des plaques différentes, une courbe d'etalonnage est nécessaire pour chaque plaque. Sie des taches d'une même substance par courrent des distances différentes sur une même plaque, il faut effectuer des mesures parallèles pour chaque tache afin de déterminer sa valeur maximale.
Notes:
Summary Experience of a new “flying spot” densitometer on ready-made thin layer plates of Cellulose F and Silica Gel F254 is reported. The tests were made to investigate some influences on the measuring results by thin layer chromatography and by subsequent measurement. On emply plates, the baselines showed considerable variation, depending on the layer material and on the direction of measurement. As preferred flow direction of the substance on the plates, that one was used which had produced relatively stable baselines. The influence of the solvent or of spray reagents colrring the background on the curve image, is small and can be neglected. Depending on the flow direction of the substance with regard to the layer direction, or depending on the measuring direction at pre-determined flow direction, different values were found when measuring the substance spot, due to its irregularity, e.g. for 1 μg 5-Hydroxy-Indole-3-Acetic acid (5 HIE) on Cellulose F plates, 80 mm2 vertically to the flow direction, and 100 mm2 parallel to the flow direction. For 5-HIE, the lower detection limit on Cellulose F or Silica Gel F254 plates is 0.1 or 0.2 μg, respectively; the standard deviation s=±0.05 μg 5-HIE. Furthermore, the measured values depend on the aperture and on the amplitude of the plate in the densitometer. The results can therefore be compared only if the flow direction, amplitude, and aperture are all identical. Due to insufficient reproducibility of the values on different plates, each plate requires its own calibration curve. Where spots of the same substance cover different distances on the same plate, it is necessary to proceed by narrow parallel shifting when measuring each spot, so as to determine its maximum value.
Type of Medium:
Electronic Resource
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF02269016
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