ISSN:
1432-1440
Schlagwort(e):
New erythrocyte G-6-PD variant
;
Gd Frankfurt
;
Structural abnormality
;
Molecular weight
;
Peptide analysis
;
Amino acid substitution
;
Lys → Glu
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Neue erythrocytäre G-6-PD-Variante
;
Gd Frankfurt
;
strukturelle Anomalie
;
Molekulargewicht
;
Peptidanalyse
;
Aminosäurenaustausch
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Lys → Glu
Quelle:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Thema:
Medizin
Beschreibung / Inhaltsverzeichnis:
Zusammenfassung Eine neue, anomale erythrocytäre G-6-PD-Variante, Gd Frankfurt, wurde nach chromatographischer Reingung auf DEAE-Cellulose, durch fraktionierte Ammoniumsulfat-Fällung und zweimalige Gelfiltration auf das rund 14000fache angereichert. Mittels Gelfiltration wurde eine Molekulargewichtsbestimmung durchgeführt, ferner wurde der SH-Gruppen-Gehalt und die Hemmung der Aktivität durch N-Äthylmaleimid bestimmt. Im Vergleich zum Normalenzym, Gd B, fand sich — bei gleichem SH-Gruppen-Gehalt — ein von der Norm nur geringfügig abweichendes Molekulargewicht von 223 000 gegenüber 243 500 beim Normalenzym und eine etwas stärkere Hemmung durch N-Äthylmaleimid. Nach tryptischer Verdauung ergab die Peptidanalyse mittels Fingerprint-Verfahrens auf Kieselgel-S-Dünnschichtplatten ein abweichendes Verhalten für 1 Peptid, während die restlichen 39 Peptide die gleiche Lokalisation aufwiesen. Die Aminosäuren-Analyse dieser differienden Peptide deckte für die neue Variante einen Austausch von Lysin gegen Glutaminsäure auf.
Notizen:
Summary A new, abnormal erythrocyte G-6-PD variant, Gd Frankfurt, was first purified chromatographically on DEAE cellulose. Further purification was performed by fractionate precipitation with ammonium sulfate and by double gel filtration on Sephadex G-200. By these procedures a nearly 14000-fold concentration was obtained. In this preparation as well as in a control preparation of the normal enzyme variant Gd B the molecular weight, the content of sulfhydryl groups and the inhibition of enzyme activity by N-ethylmaleimide was determined. The content of sulfhydryl groups was found to be the same as in the normal enzyme variant. The molecular weights are slightly different: for the abnormal enzyme variant the value obtained was 223 000, and 243 500 for the normal enzyme. The inhibition by N-ethyl-maleimide showed to be somewhat stronger in the abnormal variant than in the normal enzyme. Peptide analysis after tryptic digestion was performed by fingerprint technique on silica gel-starch thin layers. 39 peptides of the abnormal variant showed the same pattern as in the normal enzyme whereas one peptide was found in a differing localization. Amino acid analysis' of the differing peptides revealed a substitution of glutamic acid for lysine in the abnormal enzyme variant.
Materialart:
Digitale Medien
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/BF01468537
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