ISSN:
1439-099X
Schlagwort(e):
Key Words: Ouabain
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Radiotoxicity
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Apoptosis
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Schlüsselwörter: Onabain
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Strahlentoxizität
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Apoptose
Quelle:
Springer Online Journal Archives 1860-2000
Thema:
Medizin
Beschreibung / Inhaltsverzeichnis:
Hintergrund: Die Gegenwart des Na+-K+-ATPase-Inhibitors Ouabain erhöht die Strahlentoxizität. Wir haben bereits an anderer Stelle gezeigt, dass dieser Effekt bevorzugt in Tumorzellen auftritt und auf Unterdrückung der Reparaturkapazität beruht. Die Rolle der Apoptose ist in diesem Zusammenhang nicht bekannt und wurde hier untersucht. Material und Methodik: Sieben humane Zellinien mit bekanntem TP53-Status wurden mit 60Co-γ-Strahlen in Gegenwart von Ouabain bestrahlt. Zellüberleben wurde durch den Koloniebildungstest, Apoptose durch Acridine-Orange-Färbung und Zellzyklusänderungen mit Hilfe der Durchflusszytometrie untersucht. Ergebnisse: Die Erhöhung der Strahlentoxitiztät durch Ouabain, berechnet aus dem SF2-Verhältnis gegenüber Kontrollen, liegt im Bereich von 1,1 bis 2,8 und ist abhänging von der jeweils benutzten Zelllinie. Ein Einfluss des TP53-Status konnte nicht festgestellt werden. In TP53-mutanten Tumorzellen verlängert Ouabain den strahleninduzierten G2-Block um mindestens ein bis zwei Zellzyklusrunden. 20 Stunden nach Bestrahlung bewirkt Ouabain je nach Zelllinie eine Verstärkung der strahleninduzierten frühen Apoptoseereignisse um den Faktor 1,3 bis 1,7. Schlussfolgerungen: Zugabe von Ouabain bei der Bestrahlung bewirkt eine markante Erhöhung der Strahlentoxizität besonders in Tumorzellen, unabhängig vom TP53-Status. Im Muster der DNA-Schadensreaktionen zeigen wir, dass Ouabain den strahleninduzierten G2-Block drastisch verlängert und die frühen Apoptoseereignisse deutlich erhöht, und zwar sowohl in TP53-Wildtypen als auch in TP53-Mutanten. Wir folgern, dass Apoptose in der durch Ouabain ausgelösten Verstärkung der Strahlentoxizität eine wichtige Rolle spielt.
Notizen:
Background: The Na+, K+-ATPase inhibitor ouabain enhances the toxocity of irradiation and we have previously demonstrated that the drug suppresses repair capacity. The influence of ouabain on apoptosis is not known and is examined in this study. Materials and Methods: Seven human cell lines of defined TP53 status were irradiated with 60Co-γ irradiation in the presence and absence of 10−10 M ouabain. Cell survival was determined by the clonogenic assay, apoptosis by acridine orange staining and cell cycle delays by flow cytometry. Results: The ouabain-induced enhancement of radiotoxicity, expressed as the ratio of SF2's, is independent of TP53 status and ranges from 1.1 to 2.8 depending upon cell line. Ouabain prolongs the irradiation-induced G2 delay in TP53 mutant tumor cell lines by a factor greater than 2, but not in the normal lung fibroblase L132, where the cell recovery is not altered in the presence of ouabain. Twenty hours postirradiation, ouabain enhances apoptosis induced by irradiation by factors of 1.3 to 1.7 depending on the cell line. Conclusion: Ouabain preferentially enhances the radiotoxocity in tumor cells irrespective of TP53 status. In the pattern of DNA damage responses which are influenced by ouabain we show that the G2 cell cycle delay is prolonged and that early apoptosis events are upregulated in TP53 wild type and TP53 mutant cells. It is concluded that apoptosis plays a significant role in the enhancement of radiotoxocity by ouabain.
Materialart:
Digitale Medien
URL:
http://dx.doi.org/10.1007/s000660050055
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